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衰老是生物自发的过程,随着时间推移、年龄增长,机体各脏器组织功能衰退。衰老引起的心脏形态和分子学的改变,影响高龄患者的心脏功能,增加各种心脏疾病的风险,作为不良预后因素,导致死亡率上升,中医理论有寒主收引、凝滞的观点,《素问·举痛论》说“寒则气收”,“寒气客于脉外,则脉寒,脉寒则缩蜷,缩蜷则脉绌急,则外引小络,故卒然而痛。得炅则痛立止,因重中于寒,则痛久矣。”《灵枢·岁露》说“寒则皮肤急而腠理闭”,当机体受寒邪侵袭,可导致血流运行不畅。寒凝血瘀证是中医临床证候,多因身体长期处于寒湿环境,阳气受损,致使阳气的温煦和推动作用减弱。生活中长期接触寒冷的情况数见不鲜,当机体正气不足时,便会发生疾病。因老年人用药性味不宜过偏,因此研究药食同源的平性药治疗心脏衰老就有一定的社会意义。目的:观察杞红液对臭氧联合冰水浴暴露诱导大鼠心脏损伤的血液生化指标、心脏组织病理学、心脏分子生物学的影响,探讨杞红液对大鼠心脏损伤保护作用的Nrf2调控机制。方法:预防组48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组,每组8只,分别为空白对照组,模型组,维生素E组,杞红液低、中、高剂量组。空白对照组:连续28d每日予以双蒸水(15mL/kg)灌胃1次。模型组、维生素E组、杞红液低、中、高剂量组均于第1天开始,持续28d隔日置于自制臭氧柜内染毒4h;第15天开始,每日置于0～4℃冰水中20min,同时模型组每日予以双蒸水(15mL/kg)灌胃1次,维生素E组予以维生素E软胶囊(13.5mg/kg)灌胃1次,杞红液低、中、高剂量组分别予杞红液(45、90、180mg/kg)灌胃1次。第29天腹腔麻醉,腹主动脉取血,分离心脏、血管。治疗组64只雄性SD大鼠按随机数字表法分为8组,分别为14d对照组,14d模型组,42d对照组,42d模型组,42d维生素E组,42d杞红液低、中、高剂量组。14d空白组:正常饲养14d。14d模型组:持续14d每日置于自制臭氧柜内染毒4h后,置于0～4℃冰水中20min,水深以没过大鼠身体1/2至2/3为宜,第15天腹腔注射10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,分离心脏、血管。42d空白对照组:正常饲养14d,第15天开始连续28d每日予以双蒸水(15mL/kg)灌胃1次。42d模型组:持续14d每日置于自制臭氧柜内染毒4h后,置于0～4℃冰水中20 min,水深以没过大鼠身体1/2至2/3为宜,第15天开始,连续28d每日予以双蒸水(15mmL/kg)灌胃1次。42d维生素E组,42d杞红液低、中、高剂量组除连续28d每日予以维生素E软胶囊(13.5mg/kg),杞红液(45、90、180mmg/kg)灌胃1次外,余同42d模型组,第43天腹腔注射10%%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血,分离心脏、胸主动脉血管。取大鼠血清按试剂盒说明书测定GSH-Px活力,MPO活力,MDA含量,SOD活力,CAT活力,NOS活力,ET-1含量,NO含量,Hcy含量。取大鼠血浆,测凝血四项(TT、PT、APTT、FIB)。4%多聚甲醛固定心脏48小时,进行HE常规染色、Masson特殊染色,形态计量血管纤维面积比,免疫组化测血管TGF-β1表达量,Western Blot测心脏Nrf2、p-Nrf2、PERK、KEAP1、HO-1含量,比较组间差异。结果:预防实验中,与空白对照组相比,模型组T-SOD、Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低(P<0.05),MDA含量明显升高(P<0.05),PT、APTT明显降低(P<0.05),FIB含量明显升高(P<0.05),NOS活力降低(P<0.05),MPO活力升高(P<0.05),ET-1含量降低(P<0.05),光镜下Masson染色,形态计量心脏胶原纤维沉积明显增加(P<0.05),TGF-β1表达量明显升高(P<0.05)。与模型组比较,杞红液的中、高剂量均能明显回升T-SOD、Cu-Zn-SOD、CAT、GSH-Px活力(P<0.05),明显回降MDA含量(P<0.05),明显回升PT、ATPP(P<0.05),明显回降FIB含量(P<0.05),明显回降心脏细胞、血管胶原纤维沉积(P<0.05),明显回降TGF-β 1表达量(P<0.05)。治疗实验中,与14d空白组相比,14d模型组SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低(P<0.05),MDA含量明显升高(P<0.05),PT、APTT、TT明显降低(P<0.05),FIB含量明显升高(P<0.05),NOS活力降低(P<0.05),ET-1、NO含量降低(P<0.05),Hcy含量升高(P<0.05),光镜下Masson染色,形态计量血管胶原纤维沉积明显增加(P<0.05),TGF-β 1表达量明显升高(P<0.05),此模型评价证明造模成功。与42d空白对照组相比,42d模型组SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低(P<0.05),MDA含量明显升高(P<0.05),PT、APTT、TT 明显降低(P<0.05),FIB 含量明显升高(P<0.05),ET-1、NO含量降低(P<0.05),Hey含量升高(P<0.05),光镜下Masson染色,形态计量心脏胶原纤维沉积明显增加(P<0.05),TGF-β 1表达量明显升高(P<0.05),Nrf2、p-Nrf2、PERK、HO-1含量降低(P<0.05)。与42d模型组相比,杞红液中剂量均能明显回升SOD、CAT、GSH-Px 活力(P<0.05),明显回降 MDA 含量(P<0.05),明显回升 PT、ATPP、TT(P<0.05),明显回降FIB含量(P<0.05),明显回升ET-1、NO含量(P<0.05),明显回降Hcy含量(P<0.05),明显回降血管胶原纤维沉积(P<0.05),明显回升Nrf2、p-Nrf2、PERK、HO-1 含量(P<0.05)。结论:杞红液通过增加心脏Nrf2含量,提升了 p-Nrf2含量,入核后调控氧化应激系统,增强了对其下游基因表达,包括SOD、CAT、GSH-Px、NOS、MPO,清除MDA,产生N0,保护心脏;改善血液流变学,降低Hcy含量,诱导TGF-β1表达下降,降低了心脏纤维蛋白的表达,减轻氧化损伤,实现了延缓心脏衰老的效果。