胶原—硫酸软骨素支架联合酸性成纤维细胞生长因子应用于裸鼠全层皮肤缺损修复的实验研究

来源 :南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyishijian
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研究背景:皮肤缺损的愈合过程非常复杂。对于创面面积较大、受损深度较深的创面而言,选择一期行人工真皮移植术,待2~3周后行二期自体刃厚皮片移植术不失为一种优良的选择。另外,成纤维细胞生长因子(FGFs)等各种细胞因子对创面愈合的有效性已被广泛研究,但传统观点认为直接外用或在体内注射外源性FGFs可能因无法长时间维持有效浓度而不能达到理想的治疗效果,因此有团队尝试将各种细胞因子整合皮肤替代物内联合应用。但我们认为目前想要实现这类人工真皮的量产仍然有一定难度。因此,我们通过仿照市面上的人工真皮材料制造出胶原-硫酸软骨素(CS)支架材料,在一期行人工真皮移植术时,单次足剂量地联合使用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF),这在目前的临床工作上是简易且完全可行的,以探索这是否有助于Balb/c-nu小鼠背部全层皮缺损创面的愈合。研究目的:1.制备质量分数(wt.%)分别为1%、0.8%、0.6%和0.4%的4种胶原-CS支架并测量其物理性质。2.检测4种胶原-CS支架的体外细胞相容性和细胞黏附性。3.选择1种物理性质、细胞相容性和细胞黏附性均良好的支架,单次足剂量地联合应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)用于修复裸Balb/c-nu小鼠全层皮肤缺损,并评价其疗效。研究方法和结果:1.用冻干法制备4种不同分别为1%、0.8%、0.6%和0.4%的4种胶原-CS支架,且多项物理性质与其质量分数相关。2.将人脂肪干细胞(hADSCs)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别接种在4种不同质量分数的胶原-CS支架上后发现这4种胶原-CS支架均有着良好的细胞相容性和细胞黏附性能。3.联合使用rh-aFGF可以在24小时内促进接种于0.6%的胶原-CS支架内的hADSCs 和 HUVECs 增殖。4.对Balb/c-nu小鼠行全层皮肤缺损造模+人工真皮移植的一期手术,期间联合使用rh-aFGF,9天后行SD大鼠皮瓣移植的二期手术后发现小鼠全层皮肤缺损创面的第16天的植皮存活率提高,第16天、第21天和第28天的创面收缩率下降。结论:1.胶原-CS支架多项理化性质与其质量分数有关,其中,随着胶原-CS支架质量分数的降低,胶原-CS支架表面及底面的平均孔径会增大。2.这4种胶原-CS支架均有着良好的细胞相容性和细胞黏附性。对hADSCs和HUVECs而言,大孔径胶原-CS支架的体外细胞相容性更好。3.联合使用rh-aFGF可以在24小时内促进接种于0.6%的胶原-CS支架内的hADSCs 和 HUVECs 增殖。4.在一期手术中单次足剂量联合使用rh-aFGF能显著提高一期手术后第16天的植皮存活率,降低第16天、第21天和第28天的创面收缩率,从而抑制瘢痕形成。
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