【摘 要】
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研究背景:皮肤缺损的愈合过程非常复杂。对于创面面积较大、受损深度较深的创面而言,选择一期行人工真皮移植术,待2~3周后行二期自体刃厚皮片移植术不失为一种优良的选择。另外,成纤维细胞生长因子(FGFs)等各种细胞因子对创面愈合的有效性已被广泛研究,但传统观点认为直接外用或在体内注射外源性FGFs可能因无法长时间维持有效浓度而不能达到理想的治疗效果,因此有团队尝试将各种细胞因子整合皮肤替代物内联合应用
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研究背景:皮肤缺损的愈合过程非常复杂。对于创面面积较大、受损深度较深的创面而言,选择一期行人工真皮移植术,待2~3周后行二期自体刃厚皮片移植术不失为一种优良的选择。另外,成纤维细胞生长因子(FGFs)等各种细胞因子对创面愈合的有效性已被广泛研究,但传统观点认为直接外用或在体内注射外源性FGFs可能因无法长时间维持有效浓度而不能达到理想的治疗效果,因此有团队尝试将各种细胞因子整合皮肤替代物内联合应用。但我们认为目前想要实现这类人工真皮的量产仍然有一定难度。因此,我们通过仿照市面上的人工真皮材料制造出胶原-硫酸软骨素(CS)支架材料,在一期行人工真皮移植术时,单次足剂量地联合使用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF),这在目前的临床工作上是简易且完全可行的,以探索这是否有助于Balb/c-nu小鼠背部全层皮缺损创面的愈合。研究目的:1.制备质量分数(wt.%)分别为1%、0.8%、0.6%和0.4%的4种胶原-CS支架并测量其物理性质。2.检测4种胶原-CS支架的体外细胞相容性和细胞黏附性。3.选择1种物理性质、细胞相容性和细胞黏附性均良好的支架,单次足剂量地联合应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)用于修复裸Balb/c-nu小鼠全层皮肤缺损,并评价其疗效。研究方法和结果:1.用冻干法制备4种不同分别为1%、0.8%、0.6%和0.4%的4种胶原-CS支架,且多项物理性质与其质量分数相关。2.将人脂肪干细胞(hADSCs)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别接种在4种不同质量分数的胶原-CS支架上后发现这4种胶原-CS支架均有着良好的细胞相容性和细胞黏附性能。3.联合使用rh-aFGF可以在24小时内促进接种于0.6%的胶原-CS支架内的hADSCs 和 HUVECs 增殖。4.对Balb/c-nu小鼠行全层皮肤缺损造模+人工真皮移植的一期手术,期间联合使用rh-aFGF,9天后行SD大鼠皮瓣移植的二期手术后发现小鼠全层皮肤缺损创面的第16天的植皮存活率提高,第16天、第21天和第28天的创面收缩率下降。结论:1.胶原-CS支架多项理化性质与其质量分数有关,其中,随着胶原-CS支架质量分数的降低,胶原-CS支架表面及底面的平均孔径会增大。2.这4种胶原-CS支架均有着良好的细胞相容性和细胞黏附性。对hADSCs和HUVECs而言,大孔径胶原-CS支架的体外细胞相容性更好。3.联合使用rh-aFGF可以在24小时内促进接种于0.6%的胶原-CS支架内的hADSCs 和 HUVECs 增殖。4.在一期手术中单次足剂量联合使用rh-aFGF能显著提高一期手术后第16天的植皮存活率,降低第16天、第21天和第28天的创面收缩率,从而抑制瘢痕形成。
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