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目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定血培养阳性标本中微生物,并在此鉴定结果基础上对血培养中常见细菌直接进行药敏试验,为临床快速合理有效的抗血流感染治疗提供依据。利用MALDI-TOF MS快速检测耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的厄他培南水解能力,为肠杆菌科细菌耐药性的快速检测提供新途径。方法1.对491例血培养阳性标本中微生物采用MALDI Sepsityper?Kit试剂盒联合MALDI-TOF MS(简称MSK-质谱法)、分离胶联合MALDI-TOF MS(简称分离胶-质谱法)进行直接鉴定,并同时对血培养阳性标本进行常规分离培养及鉴定(简称常规鉴定),结果不符的用基因测序予以确认;2.基于分离胶-质谱法的鉴定结果,对236株血培养常见细菌同时进行K-B法直接药敏试验和K-B法常规药敏试验以及MIC法直接药敏试验和MIC法常规药敏试验,分别比对直接药敏试验和常规药敏试验的结果;3.利用MALDI-TOF MS对108株CRE与9株碳青霉烯类敏感的肠杆菌科细菌进行厄他培南水解试验。结果1.与常规鉴定(或基因测序)结果比较,MSK-质谱法直接鉴定结果显示,462例单株菌感染血培养的“种”水平符合率、“属”水平符合率、未鉴定率和鉴定错误率分别为72.5%、76.0%、23.6%和0.4%,其中常见细菌的“种”水平符合率为71.0%~92.9%;29例复数菌感染血培养中,有7例两种细菌均得以鉴定,15例鉴定出其中一种细菌,7例两种细菌均未鉴定出;MSK-质谱法鉴定时间约为40 min/样本。与常规鉴定(或基因测序)结果比较,分离胶-质谱法直接鉴定结果显示,462例单株菌感染血培养的“种”水平符合率、“属”水平符合率、未鉴定率和鉴定错误率分别为73.6%、77.3%、22.5%和0.2%,其中常见细菌的“种”水平符合率为78.6%~96.9%;29例复数菌感染血培养中,有4例两种细菌均得以鉴定,18例鉴定出其中一种细菌,6例两种细菌均未鉴定出,1例鉴定错误;分离胶-质谱法鉴定时间约为15 min/样本。2.与K-B法常规药敏试验结果相比,革兰阴性杆菌K-B法直接药敏试验结果的符合率、小误差率和大误差率分别为97.8%、1.4%和0.8%,革兰阳性球菌分别为98.5%、0.9%和0.6%;与MIC法常规药敏试验结果相比,革兰阴性杆菌MIC法直接药敏试验结果的符合率、小误差率和大误差率分别为98.0%、1.1%和0.9%,革兰阳性球菌分别为98.4%、0.9%和0.7%。以血培养阳性报警为起始时间,至获得直接药敏试验结果大约需要24 h。3.102株产碳青霉烯酶CRE的MALDI-TOF MS厄他培南水解试验结果均为阳性,6株不产碳青霉烯酶CRE与9株碳青霉烯类敏感的肠杆菌科细菌的MALDI-TOF MS厄他培南水解试验结果均为阴性,水解试验大约需要2 h。结论利用MALDI-TOF MS不仅可直接检验血培养阳性标本中微生物,也可快速检测肠杆菌科细菌对碳青霉烯类耐药性,具有快速、准确、经济、有效等优势,值得在临床微生物实验室推广应用。