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本文从以下三部分进行了阐述： 第一部分 HER2与胃癌预后的关系：一项Meta分析 目的：HER2是否影响胃癌患者的预后目前仍有争议，部分原因是由于不同研究中采用的胃癌HER2检测方法和评分标准不统一，因此对采用ToGA试验中的HER2检测方法和评分标准来判断胃癌HER2状态并且研究HER2与胃癌预后相关性的文献进行Meta分析，从而探讨HER2与胃癌预后的关系。 方法：检索数据库中研究HER2状态和胃癌预后关系的相关文献，并且限定文献中必须使用ToGA试验中的HER2检测方法和评分标准来判断胃癌HER2的状态。采用RevMan5.2软件进行Meta分析，计算合并HR及95%CI，分析HER2和胃癌预后的相关性。 结果：共11篇文献纳入Meta分析，其中9篇文献中报道了HER2状态与胃癌患者总生存期相关性的单因素分析的结果，合并HR=0.97（95%CI：0.84-1.12，P=0.63），说明HER2不影响胃癌患者的总生存期；6项研究同时报道了多因素分析的结果，合并HR=1.01（95%CI：0.75-1.35，P=0.95），表明HER2不是胃癌患者总生存期的独立预测因素；异质性检验提示这些研究间不存在或仅有轻度的异质性（单因素分析时I2=22%，P=0.25；多因素分析时I2=41%，P=0.13）。还有4篇文献报告了无复发生存期的数据，合并HR=1.08（95%CI：0.84-1.37，P=0.55），表明HER2的表达与无复发生存期也不相关；异质性检验提示这4篇文献间也无统计学异质性（I2=0%，P=0.74）。 结论：HER2状态不影响胃癌患者的总生存期和无复发生存期；HER2不能作为胃癌预后的预测因素。 第二部分 HER2和TFF3在胃癌组织中的表达及其与临床预后的关系 目的：探讨胃癌组织中HER2和TFF3的表达，并分析两者与患者临床病理因素以及生存率的关系。 方法：选取92例行胃癌手术切除的患者，使用免疫组化和荧光原位杂交法检测胃癌组织的HER2状态，免疫组化法检测胃癌组织中TFF3的表达情况，同时分析两者与患者临床病理因素以及生存率的关系。 结果：HER2在胃癌组织中的阳性率为10.9%，TFF3的阳性表达率为42.7%。TFF3阳性多见于肿瘤侵润深、TNM分期晚的胃癌患者，并且TFF3阴性的胃癌患者的生存期明显长于TFF3阳性患者，其5年总体生存率分别为57.1±7.1%对39.5±7.5%（P=0.033）。而HER2状态和患者的生存率没有显著的相关性（P=0.235）。多因素分析显示TFF3阳性是胃癌预后不良的独立预测因素（HR=2.33，95%CI：1.20–4.51，P=0.012）。HER2在TFF3阴性和TFF3阳性患者中的表达率分别为16.3%和4.7%（P=0.098），HER2表达有多见于TFF3阴性胃癌患者的趋势。HER2与TFF3蛋白在胃癌组织中的表达强度呈负相关（r＝-0.219，P＝0.036）。 结论：TFF3阳性是胃癌患者预后不良的一个独立预测因素，而HER2状态不影响胃癌患者的生存率；胃癌组织中HER2与TFF3的表达呈负相关。 第三部分 HER2调控TFF3影响胃癌细胞生物学功能的分子机制研究 目的：揭示HER2在胃癌中调控TFF3表达的分子机制及其对胃癌细胞生物学功能影响。 方法：分析CCLE（Cancer Cell Line Encyclopedia）数据库中不同胃癌细胞株HER2与TFF3基因mRNA基础表达水平以及两者的相关性；采用脂质体LipofectamineTM2000分别将针对HER2的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）以及HER2过表达质粒转染人胃癌NCI-N87细胞，荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白质印迹法（Western Blot）分别检测HER2敲减及过表达对NCI-N87细胞HER2和TFF3基因mRNA与蛋白表达水平的变化情况；双荧光素酶报告基因实验观察HER2敲减及过表达对NF-κB RelA/p50-Luc转录调控活性的影响；qRT-PCR和Western Blot检测RelA-siRNA沉默NF-κB p65基因的表达对NCI-N87细胞TFF3mRNA和蛋白表达水平的影响；EDU法和细胞划痕实验分别检测转染TFF3过表达质粒对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响；平板克隆形成实验观察TFF3过表达质粒后胃癌细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的变化；CCK-8法和Transwell小室法分别检测联合沉默HER2和TFF3表达对NCI-N87细胞增殖、迁移和侵袭的影响。 结果：CCLE数据库中38种不同胃癌细胞株的HER2和TFF3基因mRNA基础表达水平呈负相关（r值为-0.24，P＝0.049）；转染HER2-siRNA后，NCI-N87细胞HER2基因mRNA和蛋白表达水平与阴性对照组相比均明显下调，TFF3基因mRNA和蛋白表达水平随之出现上调（P＜0.05）；转染HER2基因过表达质粒后，NCI-N87细胞HER2基因mRNA和蛋白表达水平与对照组相比均明显上调，随着HER2的上调，TFF3基因mRNA和蛋白水平有下降的趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；沉默HER2基因表达可减弱NF-κB RelA/p50的转录调控活性；过表达HER2可以增强NF-κB RelA/p50的转录调控活性，并且其作用可以被RelA-siRNA所逆转；TFF3启动子上存在NF-κB RelA/p50的反应元件，转染RelA-siRNA后，NCI-N87细胞TFF3基因mRNA和蛋白表达水平明显上调（P＜0.01）；过表达TFF3后胃癌细胞增殖和迁移能力明显升高，对5-氟尿嘧啶的敏感性下降；转染HER2-siRNA和TFF3-siRNA均能抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭，而联合拮抗HER2和TFF3的表达能够发挥协同抑制作用。 结论：CCLE数据库中不同胃癌细胞株的HER2和TFF3基因mRNA基础表达水平呈负相关；沉默HER2基因能诱导NCI-N87细胞TFF3表达水平的上调；HER2可能是通过NF-κB信号通路实现对TFF3的转录调控；过表达TFF3能促进胃癌细胞增殖和迁移；联合拮抗HER2和TFF3能够协同抑制NCI-N87细胞的增殖、迁移和侵袭。