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目的:观察H3K4三甲基化在人食管鳞癌组织以及相应癌旁组织的水平,比较二者之间的差异;检验SMYD3-si RNA下调食管鳞癌细胞SMYD3表达的效应;探讨下调SMYD3基因表达对食管鳞癌细胞中H3K4三甲基化状态改变的影响。方法:1、选取14例人食管鳞癌组织及相应的食管癌旁组织,提取组蛋白,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay简称ELISA)方法,观察H3K4三甲基化的水平。2、合成下调SMYD3的3组si RNA(si RNA-440,si RNA-926,si RNA-1232)及阴性对照、阳性对照,分别转染入人食管鳞癌TE13细胞,用荧光定量PCR、Western blot技术,从m RNA水平和蛋白水平分别检测转染si RNA后人食管鳞癌TE13细胞SMYD3,筛选出干扰效果最好的si RNA;转染SMYD3-si RNA后,运用ELISA方法检测人食管鳞癌TE13细胞H3K4三甲基化水平的变化。结果:1、在14例食管癌旁组织及癌组织中,癌组织中SMYD3蛋白的H3K4三甲基化水平高于食管癌旁组织,差异具有统计学意义(p<0.05)。2、以空白对照组及阴性对照组为对照,食管鳞癌TE13细胞转染SMYD3-si RNA后,SMYD3的m RNA和蛋白表达水平均明显下降,其中SMYD3-si RNA-936干扰效果最好(p<0.05);转染SMYD3-si RNA-936后,食管鳞癌TE13细胞的H3K4三甲基化水平较阴性对照组和空白对照组有明显下降(p<0.05);而阴性对照组和空白对照组之间的差异无统计学意义(p>0.05)。结论:1、H3K4三甲基化在食管鳞癌组及相应食管癌旁组织当中均存在,提示H3K4三甲基化可能参与细胞的正常生理活动;但在人食管鳞癌组织中水平明显高于相应正常食管组织,提示食管鳞癌的发生与H3K4三甲基化增高有密切关系。从而,明确进一步研究H3K4甲基化转移酶SMYD3基因在食管鳞癌发生发展中作用及机理的意义。2、应用siRNA技术高效下调食管鳞癌TE13细胞SMYD3基因的表达,筛选出干扰效果最强的si RNA;通过si RNA技术下调SMYD3基因的表达可以导致食管鳞癌TE13细胞中H3K4三甲基化下调,证明食管鳞癌中SMYD3可能通过作用于组蛋白H3K4三甲基化,进而调节其他基因的表达。为食管鳞癌的基因治疗研究打下了实验基础,同时提示SMYD3基因可能作为食管鳞癌基因治疗的一个靶点。