【摘 要】
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目的:探究青蒿琥酯对转化生长因子β（Transforming growth factor-β,TGF-β）介导的人视网膜色素上皮细胞（Human retinal pigment epithelial,ARPE）上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的抑制作用及其作用机制,为今后PVR的防治提供新的理论基础及治疗靶点。方法:本实验选用视网膜色素上
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目的:探究青蒿琥酯对转化生长因子β（Transforming growth factor-β,TGF-β）介导的人视网膜色素上皮细胞（Human retinal pigment epithelial,ARPE）上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的抑制作用及其作用机制,为今后PVR的防治提供新的理论基础及治疗靶点。方法:本实验选用视网膜色素上皮细胞ARPE-19以及临床患者玻璃体样本作为主要的研究对象。1.用不同浓度的青蒿琥酯单独或联合10ng/ml TGF-β2处理ARPE-19细胞。（1）采用CCK-8及流式法检测细胞增殖（2）采用体外划痕法和Transwell法检测细胞迁移（3）采用ELISA法检测细胞自分泌生长因子的能力（4）胶质收缩实验检测细胞收缩能力（5）Western blot和免疫荧光检测EMT特征及smad和非smad信号通路的激活情况。2.收集对照组和增生性玻璃体视网膜病变（Proliferative vitreoretinopathy,PVR）患者的玻璃体,采用Western blot检测smad和非smad信号通路表达水平。结果:1.青蒿琥酯（50～200μM）处理ARPE-19细胞后,可以浓度和时间依赖性的方式明显抑制ARPE-19细胞的增殖、迁移以及自分泌TGF-β2的能力。2.青蒿琥酯（50～200μM）联合10ng/ml TGF-β2处理ARPE-19后可以浓度和时间依赖性的方式明显抑制TGF-β2介导的ARPE-19细胞的增殖、迁移、收缩以及自分泌TGF-β2的能力。抑制TGF-β2诱导的ARPE-19细胞EMT进程。通过抑制Smad3、p-Smad3、PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt,抑制波形蛋白（vimentin）和肌动蛋白（α-SMA）的表达。3.PVR患者玻璃体中Smad3、p-Smad3、PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt水平与对照组相比升高。结论:（1）PVR患者玻璃体中Smad和非Smad信号通路被高度激活。（2）青蒿琥酯降低ARPE-19细胞中Smad和非Smad信号通路的表达,并且可以有效抑制细胞的增殖、迁移以及TGF-β2介导的EMT进程。
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