背景与目的脑血管病是严重威胁人类尤其是中老年人健康的常见病、多发病,具有高发病率、高致残率和高致死率的特点,其张70-80%是缺血性脑血管病。脑缺血再灌注损伤是缺血性脑梗死区在血液供应恢复后出现的更严重的脑损伤,其损伤发生机制比较复杂,抑制再灌注损伤是治疗缺血性脑血管病的重要环节。尽管国内外研究者对此进行了大量的研究并取得一定进展,但仍缺乏有针对性的治疗策略中药治疗缺血性脑血管病已有悠久的历史,具有疗效确切、不良反应少、药理作用广泛等优点,可以从多个层次和多个环节上起到保护作用,特别适合脑缺血所致的多种病理改变,日益引起医学界的关注。活血开窍汤是导师李平教授治疗缺血性脑卒中的经验方,该方由天麻、牛膝、寄生、远志、葛根、川芎、地龙、丹参、赤芍组成,具有活血开窍、补肾通络的功效。多年4来的临床实践证明,此方在治疗缺血性脑卒中方面确有疗效。本实验研究通过观察缺血再灌注大鼠脑组织中NO含量和神经细胞凋亡数的变化,探讨活性开窍汤对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的机制,进一步为临床用药提供理论和实验依据,以便推广应用。方法本课题采用Wistar雄性成年大鼠作为实验动物,研究活血开窍汤对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护机制。将大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、活血丌窍汤治疗组。各组在相同条件下分笼喂养,实验丌始第一天起给予治疗组活血丌窍汤2.2g/100mg/d灌胃,假手术组和模型组分别给予等量的生理盐水灌胃,各组何天灌胃1次,连续灌胃给药5天。至造模成功后继续重复手术前的给药方式致指定时间点。末次灌胃药给药后2h根据改良的Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,NCAO)模型,90min后实施再灌注。分别于再灌注后24h、48h快速将大鼠断头处死,完整剥取大脑组织,其中每组的半数制成脑组织匀浆液用于NO检测,另半数采用心脏灌注的方法固定大脑,用于染色以观察细胞凋亡和病理变化。将脑组织匀浆液标本采用硝酸还原酶法测定N0含量,严格按试剂盒操作步骤完成。将用多聚甲醛固定的脑组织标本采用脱氧核糖核苷酸术端转移酶介导的缺口术端标记(TUNEL)染色法检测神经细胞凋亡数。高倍镜下观察,细胞核内棕黄色为阳性细胞,分别选择5个高倍视野计数TUNEL阳性标记细胞,计算平均每个高倍视野下100个细胞中的阳性细胞数。运用HE染色方法观察活血丌窍汤对脑缺血损伤的组织形态学改变。结果：经实验观察,活血开窍汤治疗组大鼠缺血再灌注24h、48h后,病理显示模型组大鼠的脑组织神经细胞损伤数目较多,且损伤严重,而治疗组显示神经细胞损伤程度明显较轻。经测定,模型组大鼠脑组织中NO的含量及神经细胞凋亡数明显升高(P<0.01),活血丌窍汤治疗组NO的含量较模型组明显下降(P<0.05),细胞凋亡数较模型组也显著减少(P<0.01)。结论活血开窍汤能改善缺血再灌注大鼠的神经功能,可通过减少脑组织中NO的含量减轻其对脑组织的损害,实验结果亦表明,活血开窍汤能抑制缺血再灌注后细胞凋亡的发展,延缓或阻止缺血区域神经细胞的死亡进程,一定程度上挽救受损的神经元,从而防止梗死病灶的扩大。