元宝草总呫酮的抗抑郁活性研究

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随着社会的发展,抑郁症在我国的发病率也日渐增加。抑郁症(Depression)是一种常见的情感障碍性疾病之一,属于慢性疾病,易复发,需要长期服药,近年来受到科学家的重视。抑郁症的治疗方法有药物疗法、精神疗法、社会疗法和行为疗法,其中药物治疗逐渐成为治疗抑郁症的主要方法。市场上可供选择的抗抑郁药很多,有化学药、天然活性成分或单味植物药。其中化学药物有不良反应和耐药性,植物药治疗慢性疾病具有一定的优势,副作用较少,因此寻找高效低毒的植物药治疗抑郁症有重要意义。元宝草Hypericum sampsonii Hance是藤黄科金丝桃属Hypericum Linn多年生草本植物,广泛分布于我国长江流域以南各地区,在越南(北部)、缅甸(东部)和印度(东北部),日本也有分布,资源丰富。民间以全草入药,具有清热解毒、凉血止血、活血调经和祛风通络功效,可用于治疗吐血、咯血、创伤出血、痛经、跌打损伤、风湿痹痛和腰腿痛等。本教研室前期研究元宝草的抗抑郁活性,元宝草的乙酸乙酯部位能明显缩短小鼠的游泳不动时间,并从乙酸乙酯部位中分离得到50个化合物,其中25个为呫酮类化合物,该类成分含量较高,为元宝草乙酸乙酯部位的主要化学成分。因此,本课题主要研究元宝草总咕酮的抗抑郁活性。该课题考察了藤黄科金丝桃属植物元宝草总咕酮部位提取、纯化工艺,应用UHPLC-Q-TOF/MS技术鉴定元宝草总咕酮类化学成分,并研究总咕酮部位的抗抑郁活性及其抗抑郁活性机制。1、提取工艺通过NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法测定元宝草全草中总咕酮的含量。利用单因素试验和正交设计法对元宝草总咕酮的提取工艺进行了研究,筛选出总咕酮的最佳提取工艺。单因素试验包括乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比和提取次数,选择影响较高的四个因素进行正交实验。根据正交实验设计结果,最终确定元宝草总咕酮的最佳提取工艺为70%乙醇,提取温度60℃,乙醇用量20倍,提取次数3次。2、纯化工艺选择4种大孔树脂和聚酰胺计算其吸附率和解析率,最后选择AB-8大孔树脂纯化富集元宝草总咕酮。考察了洗脱流速、最大上样量、乙醇洗脱溶媒和乙醇用量。最终得到15%-52%总咕酮部位,该部位元宝草总咕酮部位含量为56%,且该部位芒果苷含量为9%。3、UHPLC-Q-TOF/MS本实验建立了元宝草总咕酮的数据库,应用UHPLC-Q-TOF/MS技术鉴定元宝草总咕酮类化学成分,初步匹配元宝草咕酮类化学成分。4、药效学研究利用开野实验、小鼠强迫游泳和悬尾实验三个模型对元宝草粗提取物,元宝草总咕酮部位和单体芒果苷进行抗抑郁实验,采用高中低剂量组分别考察其对小鼠不动时间的影响。在开野实验中,均无兴奋作用。在强迫游泳中,都可显著延长小鼠的不动时间,芒果苷和总咕酮显剂量依赖性;在悬尾实验中,芒果苷高剂量、总咕酮中、高剂量、粗提物低、中剂量可延长小鼠的不动时间。总咕酮部位还有其他成分起协同作用。同时对小鼠脑内海马组织中的神经递质5-HT、NA和DA进行含量测定,初步揭示元宝草总咕酮抗抑郁活性机制可能与神经递质NA有关。
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