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黄瓜是一种重要的世界性蔬菜,也是中国种植面积最大的蔬菜之一。随着黄瓜生产环境的变化,病虫害问题显得十分突出。黄瓜土传枯萎病是一种土传病害,由致病性的尖孢镰刀菌黄瓜专化型Fusarium. oxysporum f. sp. cucumerinum J. H. Owen (FOC)引起的,是黄瓜病害中危害最为严重、造成经济损失最大的病害之一。目前,药剂防控是控制黄瓜土传枯萎病的重要方法,但是由于缺乏高效、低毒,无污染的杀菌剂,易造成农药残留,危害人们的身体健康,而且由于枯萎病为土传病害,难以实行大面积的土壤药剂处理,成本也高。作为综合防控黄瓜土传枯萎病的方法之一,生物防控正日渐受到人们的关注。本研究对黄瓜土传枯萎病高效拮抗菌进行了筛选、鉴定,研究其最佳发酵条件,并通过PCR的方法对其含有的抗生素合成基因进行了扩增,对产生拮抗物质的条件进行了研究,并测定了拮抗物质的稳定性,最后将拮抗菌与有机肥进行二次发酵形成微生物有机肥,通过盆栽试验研究了其生防效果与抗病机理。主要结果如下:(1)从黄瓜根际土壤中分离出113株形态不同的菌株,经过初筛,共得到35株对黄瓜土传枯萎病病原菌具有拮抗效果的菌株;经过复筛得到11株抑菌效果较好的菌株,其抑菌率均达到50.0%以上,其中,菌株WQJ-100的拮抗效果比较好,且比较稳定,其对尖孢镰刀菌的抑菌率达到了63.6%。通过形态特征观察和生理生化鉴定,结合16S rRNA基因同源性序列分析,初步将菌株WQJ-100鉴定为死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis)。(2)菌株WQJ-100对甜瓜枯萎病、棉花黄萎病、辣椒疫病等病原菌均具有较好的抑菌作用,抑菌率均可达到60.0%以上;其中对棉花黄萎病病原菌抑菌率最高,为75.8%。(3)通过PCR方法检测出死谷芽孢杆菌WQJ-100的基因组中含有fenB、bam和ituA、ituB、ituC、ituD基因,它们分别是Fengycin、Bacillomycin和Iturin勺生物合成相关基因。(4)菌株WQJ-100生长的最佳发酵条件为:摇床转速180r·min-1、培养温度40℃、装液量为10mL/250mL、NaCl浓度为0、初始pH7、接种量2%、以蔗糖作为碳源、以蛋白胨作为氮源。菌株WQJ-100在LB培养基中产拮抗物质的最佳条件为:培养时间72h、摇床转速为180r·min-1、初始pH7、培养温度35℃、装液量50mL/250mL瓶、接种量为1%。(5)从死谷芽孢杆菌WQJ-100的发酵液中提取的抗菌粗提物在pH为3-9范围内较稳定,pH对抑菌活性影响不大;其对紫外线照射比较稳定,经不同时间的紫外线照射后,其抑菌活性改变甚微;抗菌粗提物在80℃以下处理后活性改变甚微,而在100℃以上处理后活性明显下降;其对胰蛋白酶部分敏感,对蛋白酶K及胃蛋白酶比较稳定。(6)盆栽试验结果表明,施用由拮抗菌株WQJ-100和有机肥制备的微生物有机肥BIO,黄瓜土传枯萎病的发病率只有15.0%,防控效果达到80.7%。(7)微生物有机肥可显著促进黄瓜的生长。黄瓜移栽60d后,CK、有机肥(OF)BIO间的地上部及地下部干、鲜重均有显著性差异,并且都表现为BIO最大,OF次之。BIO的单果干、鲜重也显著高于CK及OF处理。施用BIO还可以显著提高黄瓜叶片叶绿素的含量及光合速率、蒸腾系数、气孔导度等跟光合作用有关的参数,从而提高了光合作用效率,促进植物生长。同时,施用BIO还能显著提高根系长度及根系活力,促进植株更快生长。(8)微生物有机肥可显著改变根际土壤的微生物区系。与CK相比,BIO使得细菌、放线菌及拮抗菌WQJ-100的数量显著增多,而使得真菌及尖孢镰刀菌的数量显著降低,使土壤结构朝向健康的方向发展。(9)施用BIO显著提高了黄瓜植株过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)等抗病性相关酶的活性,并显著降低丙二醛(MDA)的含量,从而降低发病率。