小鼠围着床期子宫内膜slp-2表达规律

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hziyin
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目的:子宫内膜正常蜕膜化对胚胎植入至关重要,该过程涉及子宫内膜基质细胞的增殖分化等复杂环节。已有报道证实slp-2(Stomatin likeprotein-2)参与调控细胞增殖分化,提示其在子宫内膜基质细胞蜕膜化过程中可能有一定的调控作用,而目前未见相关报道,本研究以昆明小鼠为实验材料,建立小鼠早期妊娠、假孕、人工诱导蜕膜化的动物模型,采用实时荧光定量PCR,免疫印迹和免疫组织化学技术检测小鼠胚胎围着床期子宫内膜slp-2的表达规律,并初步探讨了其对子宫蜕膜化进程的影响。方法:1.以性成熟昆明雌鼠与雄鼠或结扎雄鼠交配,得到妊娠小鼠或假孕小鼠;利用宫角注射玉米油,构建人工诱导蜕膜化动物模型。2.利用实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫组织化学对slp-2mRNA和蛋白在小鼠围着床期子宫内膜的表达规律进行检测。3.利用宫角注射技术,以反义寡核苷酸沉默slp-2的表达,借助人工诱导蜕膜化模型,观察slp-2对小鼠子宫内膜蜕膜化进程的影响。结果:1. slp-2在小鼠围着床期子宫内膜的表达具有时空特异性,slp-2mRNA和蛋白在小鼠孕5天(d5)至孕8天(d8)高表达,而假孕小鼠未见类似表达高峰;其在小鼠子宫内膜中的定位随着蜕膜化进程的发展发生变化。2.宫角注射slp-2反义寡核苷酸(A-ODNs)沉默slp-2在小鼠子宫内膜的表达之后,与注射slp-2正义寡核苷酸(S-ODNs)对照组相比,注射A-ODNs一侧子宫湿重显著低于注射S-ODNs一侧子,且注射A-ODNs一侧子宫蜕膜化标志分子PRL表达水平显著降低,蜕膜化进程受到抑制。结论:slp-2在小鼠围着床期子宫内膜的表达具有时刻特异性,其表达水平随着蜕膜化进程的发展而变化,沉默其表达则显著抑制小鼠子宫内膜的蜕膜化,提示slp-2参与调控小鼠子宫内膜蜕膜化过程,而其潜在分子机制需要进一步研究。
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