牛流行热是由病毒引起牛和水牛的急性热性传染病。它广泛流行于非洲、亚洲和大洋洲许多国家和地区。为了解牛流行热病毒中国分离株（BEFV JB76H）主要免疫原性糖蛋白G基因的分子生物学特性，以及在重组痘苗病毒和杆状病毒中的表达情况，研究制备BEFV JB76H基因工程疫苗的可行性，进行了本研究。本研究首次以RT-PCR法扩增并克隆了BEFV JB76H主要免疫原性糖蛋白G基因，并进行了脱氧核糖核苷酸序列分析。结果表明，中国分离株G蛋白基因与澳大利亚分离株之间的同源性为91％。说明我国分离株与澳大利亚分离株之间存在较大差异，这可能是由于地域的不同造成牛流行热病毒的变异。利用重组病毒技术，构建了中国分离株G蛋白基因重组痘苗病毒和杆状病毒。结果表明，G蛋白基因中存在的T5CT序列对痘苗病毒P7.5启动子具有终止信号的功能。这一序列的存在导致G蛋白基因几乎不能在天然痘苗病毒P7.5启动子的调控下，在重组痘苗病毒中得到完全表达。动物免疫实验结果表明，使用P7.5启动子的重组痘苗病毒，不能诱导动物产生具有保护效力的中和抗体。为解决这一问题，本研究构建了人工合成强启动子P_E/L重组痘苗病毒转移载体，并首次在重组痘苗病毒中采用人工合成强启动子P_E/L，成功表达了G蛋白基因。结果表明，在人工合成强启动子P_E/L的调控下，由重组痘苗病毒表达的G蛋白基因不仅糖基化水平与天然G蛋白相近，而且表达效率大大提高。对兔子的免疫结果表明，该重组痘苗病毒表达的G蛋白诱导兔子产生中和抗体的速率和效价均高于传统油苗免疫，证明该重组痘苗病毒具有作为牛流行热病毒重组痘苗病毒的潜能。本实验首次成功构建了G蛋白重组杆状病毒。结果表明，重组杆状病毒表达的G蛋白具有牛流行热病毒G蛋白的抗原特异性和免疫原性。另外，本研究探讨研究了牛流行热病毒、痘苗病毒和油苗免疫后对牛外周血淋巴细胞亚类分布的影响。结果显示，这些因素的作用均能导致牛外周血淋巴细胞中CD4⁺细胞含量的升高。这一结果为研究牛流行热病毒免疫机制提供了一个重要的参考数据。