C6胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后肿瘤组织Ang-2、VEGF表达变化的实验研究

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目的:通过建立C6胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后模型,检测分析肿瘤组织中Ang-2、VEGF基因和蛋白表达水平在治疗组和对照组的表达差异,探讨伽玛刀对胶质瘤放疗作用中血管效应的效应机制。方法:(1)通过体外培养与传代方法培育C6胶质瘤细胞,收获对数生长期细胞并制备成细胞悬液,用微量注射器大鼠颅内缓慢注射细胞悬液5微升,后用骨蜡封闭,常规饲养,2周后行MRI检查,发现肿瘤则确认建模成功,后随机分成治疗组和对照组,治疗组行伽玛刀治疗。(2)于伽玛刀治疗后7d,将大鼠处死取材,分别用免疫组化、RT-PCR、western-blotting方法检测两组瘤组织中Ang-2、VEGF基因和蛋白的表达水平,并行数据统计分析。结果:(1)结果表明采用颅内注射高浓度C6胶质瘤细胞悬液后常规饲养的方法,荷瘤大鼠建模成功率达95%以上。(2)放疗后7d取材,免疫组化结果治疗组瘤组织Ang-2阳性率为32.83%,较对照组70.01%明显降低,其差异有统计学意义(P<0.01);治疗组瘤组织VEGF阳性率为40.17%,较对照组78.23%明显降低,其差异有统计学意义(P<0.01)。(3) RT-PCR结果显示治疗组瘤组织中Ang-2 mRNA和VEGF mRNA表达水平均低于对照组瘤组织中同一基因的表达,其差异有统计学意义(P<0.05)。(4)Western blotting分析放疗后7d两组Ang-2蛋白表达情况,相对于对照组,治疗组伽玛刀放疗后Ang-2蛋白表达抑制率为50.00%,两组差异有统计学意义(P<0.05);Western blotting分析放疗后7d两组VEGF蛋白表达情况,相对于对照组,治疗组伽玛刀放疗后VEGF蛋白表达抑制率为47.09%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)本实验建立了一种稳定、可重复性高的C6胶质瘤荷瘤大鼠伽玛刀治疗后模型,为胶质瘤伽玛刀治疗的进一步基础研究提供条件(2)抑制胶质瘤组织中Ang-2、VEGF基因和蛋白的表达,可能是伽玛刀治疗胶质瘤抑制肿瘤血管生成的效应机制之一
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