茯砖茶中冠突散囊菌分类学研究

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冠突散囊菌是茯砖茶中的优势微生物,在茯砖茶的发酵过程中起着举足轻重的作用,茯砖茶的品质关键在于发花质量的好坏,金花的多少成为了茯砖茶优劣的重要指标。为了丰富茯砖茶中冠突散囊菌的种质资源,本研究以全国大部分地区茯砖茶为样品获得优势微生物冠突散囊菌并开展对其进行了分类学研究,主要研究结果如下:(1)5株“金花菌”菌株的筛选与鉴定。从全国采集的102种茯砖茶中分离出23株“金花菌”菌株,经过筛选分离得到遗传稳定性好和形态有差异的5株“金花菌”菌株(4,16,B1,B3,B7)。以形态学表型特征、电子显微镜下的结构特征和分子生物学等技术鉴定5株菌株均属冠突散囊菌。(2)形态分类学研究。5株冠突散囊菌C20上的形态特征和电子显微镜下的微观结构各有差异,其中16号菌株的差异最大,电镜下16号菌株的子囊孢子“赤道”附近出现较多小孔,这在以往的文献中从未见报道,同时在拮抗实验中,B7和16号菌株与其他菌株虽未产生明显的拮抗作用,但是它们之间形成了微弱的隔离带。研究表明冠突散囊菌由于受地域和环境等因素的影响出现了变种或亚种,其中B7或16号菌株可能为冠突散囊菌的一个变种或亚种。(3)分子分类学研究。通过18SrDNA和ITS这2种技术手段对5株冠突散囊菌进行分类,研究发现真菌18SrDNA对于种属的鉴定是一种有效手段,但对于种间及种内的研究存在缺陷。试验中5株冠突散囊菌的18SrDNA基本完全一致,而ITS序列出现了差异,通过构建系统发育树,16号菌株单独聚类为一类,表明16号菌株与其余4株菌株亲缘关系较远,可能为冠突散囊菌的一个变种或亚种。(4)化学分类学研究。采用酯酶同工酶试验对5株进行分类研究,在酯酶同工酶图谱及其构建的系统树中发现,在相异系数为0.75时,5株菌株归为4大类,16和B7归为一类,其余3株菌株各归为一大类,说明16和B7菌株与其他3株菌株之间的亲缘关系较远,进一步证明了16和B7菌株可能为冠突散囊菌的变种或亚种。
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