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关节软骨的损伤修复一直是困扰着医学的一大难题。而组织工程的出现及发展使关节软骨的修复成为可能。目前在骨组织工程中,载体支架、种子细胞和生物活性因子已成为公认的三个最重要因素。生物活性因子大多属于蛋白质,极易被体内的蛋白酶所降解,短时间内就会被机体所代谢,因而不能充分满足自身组织修复的需要,研究生长因子缓释微球,为组织工程技术修复软骨损伤提供动力。研究聚羟基丁酸与羟基辛酸(PHBHOx)载血管内皮生长因子(VEGF)微球的三种制备技术,超声乳化法制备聚羟基丁酸与羟基辛酸(PHBHOx)载血管内皮生长因子(VEGF)纳米微球、并检测其体外性能及生物学活性。采用静电纺丝法、溶剂挥发法、W1/O/W2超声乳化法分别制备PHBHOx微球并加以比较,W1/O/W2超声乳化法制备PHBHOx载VEGF纳米微球并测其载药量、包封率,以pH7.4磷酸盐缓冲液为释放介质考察了微球的体外释放性能。采用浸泡(或滴加)方法将纳米微球胶体液运用于组织工程支架。采用三步梯度筛网法培养并分离纯化的肾微血管内皮细胞,得到较高纯度及足够数量的种子细胞并与缓释纳米微球共培养,MTT法检测细胞增殖状况,实验按照培养液中所含成分不同分为三组:培养液中加入单纯VEGF(A组)、加入VEGF-P(HBHO)NPs(B组)、对照组(C组)。其中前两组的有效浓度分别设为10、20、50ng/ml,并且每组在每个浓度分别设5个时间点进行检测,采用SPSS13.0统计学软件分析。结果显示,静电纺丝法易使VEGF变性且微球较大,粘连形成膜;溶剂挥发法容易微球粘连;超声乳化法微球呈球形,外观较圆整,颗粒分布较均匀,分散性较好;超声乳化法制备的纳米微球平均粒径为524.75±67.46nm,载药量为(1.257±0.024)10-3%,包封率为90.77±1.67%,体外释药率13天可达87.89%;微球运用于组织工程支架可见微球粘附于支架上,且分布较均匀;VEGF-P(HBHO)NPs具有良好的生物学活性,能显著促进肾微血管内皮增殖;VEFGF-P(HBHO)NPs对生长因子具有良好缓释作用,比单纯VEGF对肾微血管内皮细胞有更为明显的生物学效应,可以持续促进其增殖。