阻断单核细胞趋化蛋白-1对LPS诱导炎症小鼠子宫巨噬细胞及TNF-α的影响

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目的:尾静脉注射LPS可以诱导小鼠子宫产生炎症反应,子宫内会聚集大量的巨噬细胞以及TNF-α因子。本实验通过阻断小鼠子宫内MCP-1,观察子宫巨噬细胞和TNF-α的变化,探讨MCP-1在小鼠子宫炎症反应中的作用。方法:将75只昆明种小鼠随机分为三组,分别为对照组(A组)、LPS模型组(B组)以及阻断MCP-1组(C组)。A组第一天9:00尾静脉注射PBS0.2ml,第二天同一时间注射PBS50μl;B组第一天9:00尾静脉注射LPS0.2ml,第二天同一时间注射PBS50μl;C组第一天9:00尾静脉注射LPS0.2ml,第二天同一时间注射MCP-1多克隆抗体50μl。三组小鼠分别于末次注射后的1h、3h、6h、12h、24脱颈椎处死,迅速取其子宫,左侧子宫角浸入固定液做石蜡切片处理,右侧子宫角冰浴匀浆处理。A组五个时间点分别标记为A1、A3、A6、A12、A24,另外两组做类似标记。运用免疫组化方法检测CD14+巨噬细胞数量的变化与CD14的表达,同时采用EILSA方法检测TNF-α以及阻断后MCP-1的表达量。结果:(1)对照组(A组)巨噬细胞分布于子宫内膜和外膜;模型组(B组)巨噬细胞数量多且分布均匀;阻断组(C组)巨噬细胞主要分布在外膜。(2)B组与A组相比,子宫巨噬细胞数量及CD14表达量极显著升高(P﹤0.01);子宫内TNF-α含量极显著升高(P<0.01)。(3)C组与A组相比,子宫内膜和肌层巨噬细胞数量以及CD14表达量1h、3h、6h与A组基本一致,12h、24h极显著增多(P﹤0.01);子宫外膜巨噬细胞数量以及CD14表达量极显著高于A组(P<0.01)。C组TNF-α的含量1h、3h、6h与A组基本一致,差异不显著,但在12h和24h极显著升高(P﹤0.01)。(4)C组与B组相比,子宫内膜与肌层巨噬细胞数量和CD14表达量极显著降低(P﹤0.01);子宫外膜巨噬细胞数量和CD14表达量1h、3h、6h均极显著低于B组,12h、24h与B组接近。C组TNF-α的含量极显著低于B组(P﹤0.01)。结论:(1)LPS诱导的小鼠子宫炎症反应中,巨噬细胞增多,CD14和TNF-α表达上升,这可能与MCP-1的高表达有关。(2)MCP-1可能对巨噬细胞的分布起重要作用,在小鼠子宫炎症反应中,它诱导巨噬细胞从子宫外膜和肌层向内膜迁移,参与小鼠子宫内的炎症反应。(3)阻断MCP-1可以减少巨噬细胞的数量,降低CD14以及TNF-α的表达,从而减轻小鼠子宫内部的炎症反应。
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