MMP-9在哮喘大鼠气道的表达及苗药热咳喘干预的研究

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目的通过观察基质金属蛋白酶-9(Matdxmetalloporteinase-9, MMP-9)在支气管哮喘大鼠模型气道中的表达及苗药热咳喘对其干预的影响,探讨MMP-9对支气管哮喘气道重塑的影响及热咳喘对MMP-9的调控作用,为以热咳喘为基础方的新药研发奠定基础。方法80只SD雄性大鼠为随机分为正常组(A组)、苗药热咳喘组(B组)、模型组(C组)、地塞米松组(D组),每组各20只。除正常组外,余各组均制成支气管哮喘模型。A组用生理盐水造模,其余组大鼠用含10%卵蛋白(Ovalbumin, OVA)100mg,氢氧化铝(A1(OH)3)100mg混悬液,分别第4天、11天腹腔注射致敏;从第18天起A组用等量生理盐水、其余各组用1%OVA溶液连续雾化2周激发,每次半小时,激发前半小时A组和C组用等量生理盐水灌胃、B组用热咳喘溶液灌胃、D组使用醋酸地塞米松注射液腹腔注射。各组大鼠末次激发后6小时内处死,取肺组织及气道标本,分别进行苏木素-伊红(hematoxylineosin, HE)染色观察肺组织及气道形态学变化,通过免疫组化及逆转录多聚酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术分别检测MMP-9和MMP-9mRNA在各组大鼠气道中的表达。结果1.细支气管平滑肌厚度检测:模型组较热咳喘组、地塞米松组、正常组明显增加,模型组与正常组比较,模型组高于正常组,差异具有非常统计学意义(P<0.01),模型组与热咳喘组比较,热咳喘组少于模型组,差异具有非常统计学意义(P<0.01)。模型组与地塞米松组比较,地塞米松组明显少于模型组,有非常统计学意义(P<0.01),热咳喘胶囊组与地塞米松组比较无统计学意义(P>0.05)。2.大鼠气道MMP-9及MMP-9mRNA的表达:正常组的表达最低,模型组与正常组比较,模型组高于正常组,差异具有非常统计学意义(P<0.01),模型组与热咳喘组比较,热咳喘组低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组与地塞米松组比较,地塞米松组明显低于模型组,并有非常统计学意义(P<0.01),热咳喘组与地塞米松组比较,无统计学意义(P>0.05)。结论1.热咳喘组、地塞米松组细支气管平滑肌厚度明显低于模型组,说明热咳喘对能抑制支气管平滑肌增生。2.哮喘大鼠气道中MMP-9、MMP-9mRNA的表达均明显高于正常组,说明MMP-9是支气管哮喘气道重塑的成因之一。3.热咳喘组、地塞米松组大鼠气道MMP-9、MMP-9mRNA表达明显低于模型组,说明热咳喘可通过调控MMP-9对气道重塑起到抑制作用。
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