降解含油乳化液废水高效微生物筛选及应用基础研究

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钢铁行业废水中含有大量含油乳化液,化学稳定性好,处理难度大,采用一般的物理化学方法处理难以达到理想的去除效果,目前多采用物理化学方法结合生物法进行处理。而通常的污泥中,对含油乳化液有降解作用的微生物都不是优势菌种,因此,对降解含油乳化液废水的高效微生物的富集培养及其应用基础研究具有十分重要的意义。本课题以降解含油乳化液废水高效菌群为主要研究对象,筛选出乳化效果较好的常用表面活性剂,建立了一种含油乳化液废水高效降解菌的富集培养方法,考察了温度和pH对高效菌降解含油乳化液废水过程及效果的影响,分析了经富集培养的高效菌群的群落特征。通过研究得出如下结论:(1)从5种常用表面活性剂中筛选出乳化效果较好的十二烷基磺酸钠作为本实验乳化剂,其静置30s和10min后的乳化率分别为79.87%和32.36%。实验过程中,30s乳化率的测定采用二次萃取,10min乳化率的测定采用一次萃取。在一定范围内,30s乳化率和10min乳化率都随温度的升高而提高,30s乳化率受温度影响比10min乳化率大,选择28℃作为实验控制温度。(2)建立一种降解轧制油微生物的富集培养方法,在25~28℃,pH7.5~8.5,DO2~5mg/L,经过26d的培养,在此之间逐渐增加目标污染物轧制油的浓度,可筛选出对轧制油有一定降解能力的高效菌。在培养过程中pH、DO、SV和SVI等指标均出现规律性变化。富集培养得到的降解菌的最佳作用条件为pH8.2,温度28~33℃。富集培养得到的降解含油乳化液废水微生物对油具有较好的降解效果,经过72h处理,降解率达到60%以上。(3)采用RFLP方法对高效降解菌的群落特征进行分析,高效降解菌16SrDNA克隆文库包含了84个克隆子,被分为19个OTUs,其覆盖率为78.57%,Shannon指数(H’)为2.67,Simpson指数(D)为0.90,丰富度(R)为4.06,均匀度(E)为0.91。构建的降解含油乳化液废水高效菌克隆文库包含了大部分细菌种群,代表了样品微生物多样性。(4)测序结果对比已知16S rDNA,相似度最高的菌株分布在8个门11个纲13个目15个科15个属,其中,变形菌门(Proteobacteria)占绝对优势(52.38%),其结果与国内外研究结果基本相似,变形菌门为最优势菌,另外还发现了与栖热嗜油菌属Thermoleophilum album相似度为100%的菌株,它们在油类的降解中发挥着不同的作用并在工业含油乳化液废水的降解中具有一定的应用前景。
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