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为了提高精液保存后品质,分别对马精液保存稀释液、冻前预处理、冷冻保护剂和解冻进行了研究。实验一:进行马精液常温、低温和超低温稀释液及冷冻剂型的筛选,并比较了不同个体马精液品质差异。结果表明:(1)常温保存时, 2.5%甘油液和7%葡萄糖液精子活率显著高于5%甘油液和0.9%Nacl液(P<0.05),存活时间极显著高于5%甘油液和0.9%Nacl液(P<0.01);(2)低温保存时,10%奶粉液和5%卵黄液精子活率显著高于0.8%卵黄液(P<0.05),极显著高于7%葡萄糖液(P<0.01),存活时间较0.8%卵黄液和7%葡萄糖液差异极显著(P<0.01);(3)冷冻保存时,11%乳糖液、10%蔗糖液和4%果糖液颗粒冻精活率均极显著高于0.1%EDTA液、3%葡萄糖液和1.25%Tris液(P<0.01);细管冻精活率显著高于3%葡萄糖液和1.25%Tris液(P<0.05),极显著高于0.1%EDTA液(P<0.01),且同一种稀释液的颗粒冻精和细管冻精的冻后活率和复苏率差异显著(P<0.05)。10%蔗糖液和4%果糖液冻后精子顶体完整率极显著高于11%乳糖液(P<0.01),畸形率显著高于11%乳糖液(P<0.05),颗粒和细管冻精差异不显著(P>0.05);(4)马原精活力和冻后精子活率存在个体差异(P<0.05)。实验二:初步探讨了冻前预处理对马精液保存效果的影响。结果表明:(1)相同离心速度离心7min, 10min冻后精子活率及复苏率显著高于离心15min的(P<0.05);但2000r/min和3000r/min离心后精子活力较1000r/min和1500r/min显著下降;1000r/min和1500r/min分别离心7min, 10min冻后精子活力和复苏率差异不显著(P>0.05);(2)精液与精清比在l/l和1/2时,其冻后活率及复苏率显著高于0/l和1/4时(P<0.05);(3)精液与稀释液之比为1:2和1:3时其冻后精子活力和复苏率显著高于1:1(P<0.05);(4)精液平衡2h、3h和4h冻后精子活力和复苏率差异均不显著(P>0.05);(5)采用铜网和氟板为冷冻材质时冻后精子活力和复苏率极显著高于采用钢板(P<0.01);(6)液氮熏蒸法冻后精子活力和复苏率极显著高于直接投入液氮法(P<0.01);(7)在始冻温度为-80℃、-110℃和-140℃下分别熏蒸5min、7min、10min和15min,其冻后精子活力和复苏率差异均不显著(P>0.05)。实验三:初步研究了不同冷冻保护剂和解冻方法对马精液保存效果的影响。结果表明:(1)当用国产甘油、进口甘油、甘油+DMSO作为冷冻保护剂时其冻后精子活力和复苏率显著(P<0.05)高于用乙二醇和DMSO作为保护剂。(2)3.8%、5%、6%甘油浓度解冻后精子活力和复苏率显著(P<0.05)高于7%甘油浓度,极显著(P<0.01)高于9%甘油浓度;(3)0.1%EDTA解冻液冻后精子活力和复苏率显著(P<0.05)高于其它6%蔗糖、2.9%柠檬酸钠、5%葡萄糖解冻液,畸形率和顶体完整率显著(P<0.05)低于6%蔗糖和2.9%柠檬酸钠,与5%葡萄糖解冻液差异不显著(P>0.05)。(4)干解冻和湿解冻对冻后精子活力、复苏率、畸形率和顶体完整率等没有显著影响(P>0.05)。(5)58℃和78℃解冻后其精子活力和复苏率显著(P<0.05)高于38℃下解冻,极显著(P<0.01)高于4℃下解冻,但冻后精子畸形率和顶体完整率差异均不显著(P>0.05)。研究表明,马精液常温保存时,7%葡萄糖液保存效果最好;低温保存时,5%卵黄液保存效果较好;冷冻保存时,4%果糖液效果较佳。马精液冷冻前采用1500r/min离心10min,弃精清,留精清与精液之比为1/2,再用冷冻保存稀释液(6%甘油或(4.5%甘油+1.5%DMSO))以1:2的稀释比例,在4℃下平衡3h后以铜网为材质,以液氮熏蒸法为冷冻方法,在-80℃～-140℃下熏蒸5min～15min,用干解冻或湿解冻在58℃或78℃下解冻,马精液保存效果较好,且颗粒冻精优于细管冻精。