论文部分内容阅读
聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoate或PHA)是由许多种类的细菌在非平衡营养条件下合成的聚酯，在体内主要作为碳源和能源的储存物质。豚鼠气单胞菌(AeromonaspunctataFA440，原来命名为AeromonascaviaeFA440)与嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila4AK4)都能利用月桂酸(十二碳脂肪酸)合成3-羟基丁酸(3HB)和3-羟基己酸(3HHx)的共聚物(PHBHHx)。PHBHHx是PHA中的一种，具有更加优良的材料性能和更加广泛的应用前景。具有不同3HHx含量的PHBHHx材料具有不同的的性质和用途。A.hydrophila4AK4所合成的PHBHHx中3HHx的含量比较恒定大约为15mol％，这就限制了PHBHHx的广泛应用。并且该菌只能利用价格昂贵的相关碳源，如脂肪酸和油类作为底物来合成PHBHHx，这就使得PHBHHx的生产成本比较高。因此本论文的研究目的就是能够从一定程度上解决上述两个难题。
由于A.punctata的三个PHA合成相关基因phaP(编码PHA颗粒结合蛋白)，phaC(编码PHA合酶)和phaJ(编码烯脂酰-CoA水合酶)与A.hydrophila4AK4的合成相关基因具有高度的同源性，因此将来自A.punctata的这三个基因单独或者共同导入野生型A.hydrophila4AK4以阐明影响PHBHHx中单体组成和PHBHHx积累量的因素。实验结果显示，在提高3HHx的含量上phaC基因的表达比phaP效果更加明显，而phaJ几乎没有作用。
第二部分内容为通过基因工程的手段构建重组A.hydrophila4AK4和恶臭假单胞菌，使其能够利用非相关碳源如葡萄糖酸或者葡萄糖代替脂肪酸来合成PHBHHx。