多糖修饰的CdTe量子点在基因传递系统中的研究

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量子点是一种由Ⅱ-Ⅵ族或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒,量子点因其优良的光学性质,在细胞成像、生物分子检测、药物运载等方面得到了较为广泛的应用。但是传统的有机相量子点水溶性较差,毒性较大,稳定性较差,这些缺点成为它们在生物体系应用中的瓶颈。本文从这个角度出发,开展了相关实验,致力于解决以上问题。我们制备了水溶性CdTe量子点,并用阳离子多糖SPPS对其进行修饰,将其应用于基因传递系统,这些工作都为量子点的进一步应用提供了理论依据。   第一章综述   对量子点的性质、发光原理、表征技术进行了简要综述,比较两种常用的制备方法的优缺点,对量子点在生物医学领域的应用作了简单介绍;对多糖的基本性质和作为基因转运载体的优点进行简要描述,简单介绍了多糖修饰的CdTe量子点的特点。   第二章水溶性CdTe量子点的制备及表征   以碲粉、高氯酸镉和巯基丙酸为原料,采用水相制备法制备了水溶性CdTe量子点,系统地研究了镉碲比、MPA的量、pH值、回流时间、反应温度等反应条件对CdTe量子点生长速率和荧光强度的影响;采用透射电镜、Zeta电位粒径仪、红外光谱、X射线衍射等多种表征技术对制备的CdTe量子点进行表征评价;采用罗丹明B为参比物质,对CdTe量子点的荧光量子产率进行测定。   第三章多糖-CdTe量子点复合物的制备及评价   采用静电络合的方法,用阳离子多糖SPPS对CdTe量子点进行修饰,制备SPPS-CdTe量子点复合物,采用琼脂糖凝胶电泳、红外光谱、TEM、Zeta电位粒径仪等表征技术对制备的不同质量比的复合物进行表征。结果表明制备的SPPS-CdTe量子点复合物呈球形,粒径为纳米级别,且分布均匀。   采用MTT法对SPPS-CdTe量子点复合物的细胞毒性进行测定,结果表明,SPPS-CdTe量子点复合物的细胞毒性小于游离CdTe量子点的细胞毒性。采用活细胞工作站观察SPPS-CdTe量子点复合物对不同细胞的荧光标记情况。结果表明,多糖修饰后的CdTe量子点能够被细胞吞噬进入细胞核,而未修饰的CdTe量子点只能进入细胞质。   第四章多糖-CdTe量子点复合物基因传递研究   多糖修饰的CdTe量子点作为基因转运载体,将pTGF-β1压缩包裹成纳米粒子用于基因转染测定,以MTT法对其细胞毒性进行评价,活细胞工作站观察对HepG2细胞的细胞摄取情况。结果表明随着多糖比例的增加,转染效率和细胞存活率也随之逐渐增大,2h后HepG2细胞的细胞质和细胞核均显示较强的红色荧光。
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