【摘 要】
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L-天冬酰胺酶(L-asparaginate amidohydrolase,EC 3.5.1.1)能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中。在医药行业中,可用于治疗急性淋巴细胞白血病、霍奇金淋巴瘤和淋巴系统恶性肿瘤等多种疾病,在食品行业中,可用于高温油炸食品中,减少致癌物质丙烯酰胺的生成。本研究通过构建酶活及热稳定性显著提高的L-天冬酰胺酶突变体,并
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L-天冬酰胺酶(L-asparaginate amidohydrolase,EC 3.5.1.1)能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中。在医药行业中,可用于治疗急性淋巴细胞白血病、霍奇金淋巴瘤和淋巴系统恶性肿瘤等多种疾病,在食品行业中,可用于高温油炸食品中,减少致癌物质丙烯酰胺的生成。本研究通过构建酶活及热稳定性显著提高的L-天冬酰胺酶突变体,并通过5′非翻译区(UTR)改造以及培养基优化,实现L-天冬酰胺酶的高产发酵。主要研究结果如下:(1)将米
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熊果酸作为重要的乌苏烷型五环三萜,具有抗癌、抗糖尿病、抗溃疡以及降血脂的作用;白桦脂酸作为羽扇豆烷型五环三萜的代表,不仅具有较高选择性的抗黑色素瘤活性,还有出色的抗HIV活性;摩尔酸作为齐墩果烷型五环三萜,具有细胞毒性、抗HIV、抗HSV、抗炎和抗糖尿病等多种药理特性。但是这类化合物结构复杂,难以实现化学合成。目前,主要通过从植物中提取的方式来制备。本研究基于合成生物学策略,通过CRISPR/Ca
脂肪酸乙酯(fatty acid ethyl ester,FAEE)是新世纪以来最具有潜力的新型能源,微生物细胞工厂生产FAEE相较于目前普遍的化学合成方法具有诸多优势,例如对环境污染小,生产成本低等。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有高产乙醇和脂肪酰辅酶A的潜力,是构建高产FAEE细胞工厂的重要底盘细胞。本文利用代谢工程手段理性改造酿酒酵母细胞,构建了高效合成FAE
染料脱色过氧化物酶(Dy Ps)属于一种以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。因为其能够降解蒽醌类染料,Dy Ps成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活的方法是Dy Ps后续应用的关键所在。本论文将经优化的细菌红球菌(Rhodococcus jostii)RhDypB基因,在E.coli BL21(DE3)中进行了异源表达得到重组蛋白,并开展了相应的基础应用
细菌纤维素(Bacterial cellulose,BC)具有较高的比表面积和孔隙率,良好的成膜性和机械性能,优异的可降解性和生物相容性,在纤维基可穿戴材料,压力传感器组件方面具有广泛的应用空间。本文以三氯化铁(Fe Cl_3)为氧化剂,采用原位聚合法在细菌纤维素分散液中合成聚吡咯(Polypyrrole,PPy)分别通过抽滤、冷冻干燥工艺构筑新型细菌纤维素/聚吡咯导电膜和细菌纤维素/聚吡咯复合网
作为一种高附加价值的稳定剂和保护剂,四氢嘧啶在酶工业、化妆品和生物医药等领域应用广泛,可由一些中度嗜盐微生物天然合成,但需要高浓度盐激诱导。本研究在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源构建四氢嘧啶合成途径,并对其进行理性代谢工程改造,构建了一株以发酵温度控制四氢嘧啶合成的高产菌株。(1)以高拷贝表达质粒pFT28为载体,在大肠杆菌MG1655中异源表达来自伸长盐单胞菌(Halomon
生物质资源分布广泛、储量丰富,常采用酶法降解的方式提高其利用率,同时该方法也可生产发酵糖、生物乙醇或高附加值产物。作为高附加值产物之一,阿魏酸是一种天然抗氧化剂,在治疗阿尔兹海默症、糖尿病、心脑血管疾病等方面有重要作用。阿魏酸酯酶能催化阿魏酸与多糖、木质素间的化学键断裂,从而释放阿魏酸,是降解生物质并生产阿魏酸的关键酶。但目前阿魏酸酯酶的低酶活力等缺点限制了其应用,因此获得产酶活力高的菌株是研究关
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)也称为呕吐毒素,是小麦赤霉病病原菌禾谷镰刀菌产生的代谢产物,可污染包括小麦,大麦,燕麦,黑麦和玉米等在内的主要农作物,并出现在面条和啤酒等食品中;发生率高,不易被降解,且具有多种毒性,一旦产生将通过食物链传递,对人体和动物的健康均产生巨大威胁。通过细胞毒性实验研究细胞在DON刺激下引发的生物标志物变化,对探究其作用机理,评估DON与毒性间的
花生粕作为花生榨油的副产物,是一种重要的蛋白饲料原料,但由于氨基酸不平衡,特别是精氨酸与赖氨酸比例严重失衡的问题,且易氧化、难储存,限制了其在动物养殖上的应用。因此,筛选能够高效利用精氨酸且不产生物胺等有害物质的乳酸菌,并将其应用于发酵花生粕,对解决花生粕赖氨酸和精氨酸比例失衡、提高花生粕的营养和功能具有重要的实用价值。从花生粕、浸米水、黄酒发酵液、泡菜发酵液、东北酸菜中初步筛选出乳酸菌,通过改良
脂肪酶因具有高效的催化活性、底物特异性、功能多样性等特点,被广泛应用到各行各业中。目前,关于耐热脂肪酶报道相对较少,且商业脂肪酶价格昂贵,品种稀缺,限制了脂肪酶的应用范围。为获得耐热性质的脂肪酶,本研究合成了古细菌嗜热玫瑰红球菌的预测脂肪酶基因,利用基因工程技术在大肠杆菌中异源表达耐热脂肪酶,主要研究内容和结果如下:(1)构建了四个表达载体,分别为大肠杆菌来源的分子伴侣硫氧还蛋白与脂肪酶共表达载体
金属纳米簇具有成本低、易制备、生物相容性好等特性,已广泛应用于金属离子、蛋白质、核酸等多种物质的检测,而在农药检测方面的应用相对较少。近年来,有机磷农药和氨基甲酸酯类农药在农业生产中大量使用,对人体健康和环境造成威胁。在之前的报道中,基于有机磷农药和氨基甲酸酯类农药对特定酶(乙酰胆碱酯酶等)活性的抑制作用发展了许多传感器,但是酶成本较高且酶活性容易受环境影响。基于此本文主要在无酶的条件下利用金属纳