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目前浅表性膀胱癌的治疗方案主要是经尿道电切并辅以术后定期膀胱灌注。膀胱灌注是通过导管将化疗药物注入膀胱内以达到局部治疗的一种方法。与传统的全身化疗相比,膀胱灌注具有保持局部药物浓度高、不用考虑复杂的全身血液和淋巴循坏,以及减少全身毒副作用等优点。但是,非肌层浸润性膀胱癌患者的术后复发率仍较高。这主要是由于灌注药物的穿透性较差以及药物在膀胱内的滞留时间较短。[目的]本研究旨在构建一种能够增强药物在膀胱壁的穿透性以及延长药物在膀胱内滞留时间的递药系统。[方法]首先将第5代聚酰胺一胺(G5.0 PAMAM)树状大分子作为载体,聚乙二醇(PEG)作为修饰剂制备成PAMAM-PEG。然后将化疗药物阿霉素(DOX)通过物理方法包载在PAMAM的内部制备成PP-DOX纳米粒。为延长药物在膀胱内的滞留时间,将制备成的PP-DOX纳米粒与漂浮凝胶结合形成PP-DOX/Gel载药体系。通过动态光散(DLS)和透射电镜(TEM)对制备成的PP-DOX纳米粒进行表征。采用CCK8方法评价PAMAM-PEG对T24细胞的生物相容性。用透析袋法观察PP-DOX在不同环境下的体外释放行为。用溶出仪观察PP-DOX/Gel在人工尿液中的释放情况。通过荧光酶标仪测定药物在体内的释放进而考察灌注药物在膀胱内的滞留时间。在体内实验中,运用冰冻切片以及组织学检查的方法研究PP-DOX的渗透能力以及PP-DOX对膀胱粘膜的影响。[结果]PP-DOX纳米粒的粒径大小约13nm, zeta电位约+3.78mV。透射电镜下观察PP-DOX纳米粒呈圆形,均匀分布。PP-DOX纳米粒的稳定性测定分别于PBS (pH 7.4)和人工尿液中进行。结果显示24h内纳米粒在两种环境下都能保持着良好的稳定性。细胞毒性实验显示：相对PAMAM而言,PAMAM-PEG具有较低的毒性。即使浓度达到800μg·ml-1, PAMAM-PEG对细胞仍然没有什么毒性。体外释放实验表明PP-DOX具有明显的缓释作用和优良的pH敏感性。在酸性环境下,PP-DOX会释放出更多的阿霉素。而将PP-DOX与漂浮凝胶结合后,PP-DOX/Gel完全释放的时间可达3.5h。体内释放实验显示,在膀胱内注入游离阿霉素和PP-DOX溶液后药物浓度立即达到高峰,但随着第一次排尿则迅速降低至最低值。而对于PP-DOX/Gel而言,在第一次排尿前释放13.3%,且在第一次排尿后可以继续缓慢释放所载的药物。体内渗透性实验表明PP-DOX在膀胱壁的渗透深度明显高于游离阿霉素组。另外,相对于其他三组,PP-DOX/Gel组在灌注2h后可见到更多的阿霉素残留在膀胱组织内。最后我们从灌注后膀胱组织形态学的改变可以看出,生理盐水组和游离阿霉素组的膀胱粘膜还是保持基本完整。而在PP-DOX灌注后可见膀胱伞细胞间的紧密连接遭到了破坏。[结论]由PAMAM和漂浮凝胶组成的PP-DOX/Gel复合载药体系可以增强药物在膀胱壁的穿透性和延长药物在膀胱内的作用时间。该载药体系为实施有效的膀胱灌注提供了一种新的给药思路,并且有望在未来应用于膀胱肿瘤的治疗中。