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目的:观察多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢的形态与病理学改变;研究PCOS大鼠是否存在胰岛素抵抗(IR)及高瘦素血症,并探讨雄激素、胰岛素抵抗及瘦素之间的相互关系;检测瘦素(Leptin)及其长型受体(ob-RL)在下丘脑、垂体、卵巢和胰腺的分布和表达,探讨瘦素在PCOS发病机制中的作用。
方法:
1. PCOS动物模型的建立选用普通级23日龄幼年雌性Sprague Dawley(SD)大鼠30只,均在23日龄断奶,喂以颗粒饲料。依窝别体重平均分为两组,PCOS组及正常对照组各15只。两组平均体重分别为44.0667±1.49433g和44.2000±5.21262g,差异无显著性(P>0.05)。PCOS组皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)6毫克/100克/天+0.2毫升注射用水,对照组同期皮下注射0.2毫升注射用水,共20天。
2.标本收集及测定
2.1.胰岛素释放试验及口服葡萄糖耐量试验大鼠均于注药第20天晚20时开始禁饮食,次日上午8时称空腹体重,灌服50%葡萄糖液(葡萄糖3 g/kg体重)行葡萄糖耐量试验(0GTT)及胰岛素释放试验,分别在空腹、灌服后30、60及120min鼠眼眶采血,2000转/分离心1 5分钟取血清,氧化酶法测定即刻血清血糖水平,剩余标本放置在-20℃冰箱保存,放射免疫法测定血清胰岛素水平。
2.2.瘦素(Leptin)及性激素系列腹腔注入4%水合氯醛(400mg/kg体重)麻醉大鼠,剖开胸腔暴露心脏,用注射器经心腔采血,2000转/分离心15分钟后取血清标本放置在-20℃冰箱保存,放射免疫法测定血清FSH、LH、E<,2>、P、T及Leptin水平。
2.3.组织标本开腹取双侧卵巢分离脂肪组织并在电子精密天平上称重,然后取胰腺,开颅取脑及垂体,分别置于10%中性福尔马林溶液中固定24h、石蜡包埋,以备行光镜观察及免疫组织化学法检测瘦素(Leptin)及其长型受体(ob-RL)的表达。每组各有三只大鼠取一侧卵巢,迅速修切组织块成1mm<'3>的小块,固定于4%戊二醛中48小时后,包埋、切片,行电镜观察。
结论:
1.脱氢表雄酮致PCOS大鼠卵巢符合多囊卵巢的病理改变,形态学的改变是其激素分泌改变的基础。
2.PCOS的形成和发展主要与高雄激素血症及胰岛素抵抗相关,PCOS的胰岛素抵抗主要表现为选择性地影响糖代谢而不影响细胞的生长,瘦素可能通过胰岛素抵抗作用来调节生殖功能。
3.本研究首次报道Leptin及ob-RL在PCOS大鼠性腺轴及胰腺的表达,PCOS大鼠卵巢组织Leptin及ob-RL的表达显著降低,与血清leptin降低相一致。