菠菜提取物的制备研究

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菠菜(Spinacia oleracea L.)为藜科菠菜属的植物,研究发现,菠菜中所含的20-羟基蜕皮激素在抗肌肉萎缩方面具有良好的应用前景。本论文以产品开发为目的,制备富含20-羟基蜕皮激素的菠菜提取物,通过单因素实验以及响应面试验设计考察了从菠菜中提取和富集20-羟基蜕皮激素的较佳工艺条件。较佳提取工艺条件:提取溶剂75%乙醇,液料比11:1,提取时间67 min,加热回流提取两次;较佳大孔树脂富集条件:上样浓度165 mg(药材)/mL,上样流速2.0mL/min,溶液pH 3.5;洗脱溶剂乙醇浓度87%,洗脱流速2.0 mL/min,洗脱体积8 BV。经过富集后的菠菜提取物中20-羟基蜕皮激素的含量达到0.92%。进一步摸索了菠菜提取物中20-羟基蜕皮激素的纯化方法,通过硅胶和葡聚糖凝胶柱层析两步法快速制备20-羟基蜕皮激素,其纯度可达83.9%。并对所制备的菠菜提取物进行LC-MS~n分析,对其所含的9个主要成分进行了定性鉴别,包括20-羟基蜕皮激素和8个黄酮苷类化合物:patuletin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-[β-D-apiofuranosyl(1→2)]-β-D-glucopyranoside;patuletin-3-O-β-D-glucopyr anosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside;spinacetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)[β-D-apiofuranosyl-(1→2)]-β-D-glucopyranoside;spinacetin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosie;3,6-dimethyl-quercetag-etin-4’-O-glucuronide;5,7,4’-trihydroxy-3,6,3’-trimethoxyflavone-4’-O-Glucuronide;5,3’,4’-trihydroxy-3-methoxy-6:7-methylenedtoxyflavone-4’-β-D-glucuronide;5,4’-dihydroxy-3,3’-dimethoxy-6:7-methylenedioxy-flavone-4’-β-D-glucuronide
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