[目的]　　 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我国华南地区的高发性恶性肿瘤，近年来研究表明鼻咽癌干细胞在鼻咽癌的复发和转移中起关键性作用，但是目前对鼻咽癌干细胞生物学特性和相关分子机制了解甚少，其主要原因在于目前尚无可用于分离和以未分化状态扩增培养鼻咽癌干细胞的方法。本课题拟采用无血清悬浮培养技术筛选和扩增培养干细胞样球形成细胞，并探讨其相关的生物学特性，从而为进一步阐明鼻咽癌干细胞相关分子机制和寻找靶向杀死鼻咽癌干细胞的方法提供素材。　　 [方法]　　 利用无血清悬浮培养技术评价不同分化程度鼻咽癌细胞株中球形成细胞比例并从低分化的鼻咽癌细胞株中分离培养成球形成细胞，利用MTT法，软琼脂克隆形成试验，分别评价成球细胞的耐药性，克隆形成能力，然后利用RT-PCR，流式细胞技术和免疫荧光细胞技术分析在成球细胞及原代鼻咽癌细胞株中“干性因子”：OCT-4、β-catenin的表达情况，最后利用流式细胞技术初步分析成球细胞和原代鼻咽癌细胞株中CD133的表达情况　　 [结果]　　 恶性程度最高的鼻咽癌细胞株CNE-2中成球细胞比例最高，其次为低分化鼻咽癌细胞株HONE-1和SUNE-1，而高分化鼻咽癌细胞株CNE-1中没有分离到成球细胞。球形成细胞CNE-2S(来源于CNE-2的球形成细胞)，较CNE-2具有较强的抗肿瘤药物耐药性，克隆形成能力，含有较高比例的OCT-4+细胞和CD133+细胞，并且在细胞浆和细胞核内干性因子β-catenin呈较高表达。　　 [结论]　　 利用无血清悬浮球培养技术分离了具有干细胞特性的鼻咽癌球形成细胞亚群，并对其肿瘤干细胞特性进行了初步观察，为进一步了解鼻咽癌肿瘤干细胞的特性和筛选靶向消灭鼻咽癌干细胞提供了可能。