【摘 要】
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CDPKs (calcium-dependent protein kinases)是在植物中首先发现的一种钙依赖型蛋白激酶,属于丝氨酸/苏氨酸激酶,可以不经钙调素的作用而直接被钙信号激活,在植物生长发育和
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CDPKs (calcium-dependent protein kinases)是在植物中首先发现的一种钙依赖型蛋白激酶,属于丝氨酸/苏氨酸激酶,可以不经钙调素的作用而直接被钙信号激活,在植物生长发育和适应逆境过程中起重要的调节作用。但其作用机制仍不很清楚。本研究在前期分离获得应答多种逆境的辣椒CaCDPK4全长cDNA的基础上,进一步进行其亚细胞定位以及超表达和RNAi的载体构建和遗传转化,获得辣椒转基因植株,为进一步开展CaCDPK4在辣椒中的功能分析奠定基础。主要结果如下:1、通过构建CaCDPK4与YFP融合蛋白的瞬间表达载体,并利用基因枪轰击洋葱表皮进行亚细胞定位,结果表明,CaCDPK4定位于细胞质中。2、分别构建了辣椒CaCDPK4的超表达pK7WG2-CaCDPK4、RNAi载体pHELLSGATE12-CaCDPK4,并进行了测序验证。开展了辣椒农杆菌介导的遗传转化,在所获得的转基因植株中,PCR鉴定出3株pK7WG2-CaCDPK4和2株pHELLSGATE12-CaCDPK4的转基因T0代植株。以上研究结果为进一步通过超表达和RNAi研究辣椒CaCDPK4候选基因的功能奠定了基础。
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