【摘 要】
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翼柄碎米花为十字花科碎米荠属植物,分布于中国黑龙江省、吉林省、辽宁省等局部区域及朝鲜半岛。翼柄碎米花被用于止血、降压、镇静等,但其他药理作用尚无研究。本实验以翼柄碎米花为研究对象,探究其抗炎作用及抗氧化生物活性,为翼柄碎米花后续开发与应用提供科学依据及理论支持。在本实验中,使用硝酸铝比色法检测翼柄碎米花提取物的总黄酮含量,使用高效液相色谱测定黄酮类单体成分。结果显示,翼柄碎米花提取物总黄酮、杨梅素
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翼柄碎米花为十字花科碎米荠属植物,分布于中国黑龙江省、吉林省、辽宁省等局部区域及朝鲜半岛。翼柄碎米花被用于止血、降压、镇静等,但其他药理作用尚无研究。本实验以翼柄碎米花为研究对象,探究其抗炎作用及抗氧化生物活性,为翼柄碎米花后续开发与应用提供科学依据及理论支持。在本实验中,使用硝酸铝比色法检测翼柄碎米花提取物的总黄酮含量,使用高效液相色谱测定黄酮类单体成分。结果显示,翼柄碎米花提取物总黄酮、杨梅素和槲皮素含量分别为41.13mg/g、2.88mg/g和0.36mg/g。在体外抗炎实验中,通过使用LPS刺激腹腔巨噬细胞(PMs),用不同浓度的翼柄碎米花提取物处理PMs,使用ELISA、qPCR、免疫印迹、细胞荧光染色等方法检测翼柄碎米花提取物对LPS诱导的PMs炎症介质(NO、PGE2、TNF-α、IL-6和IL-1β)含量以及MAPK、NF-κB和JAK/STAT信号通路中相关蛋白表达水平的影响,探明其体外抗炎作用。结果显示,翼柄碎米花提取物可抑制体外炎症模型中的NO、PGE2、TNF-α和IL-1β的表达,并呈现一定的浓度依赖性;可抑制MAPK信号通路中P38的磷酸化、NF-κB的核移位和JAK/STAT中IRF3、STAT1、STAT3的磷酸化,且呈现一定的浓度依赖性。表明翼柄碎米花提取物可通过调控MAPK、NF-κB和JAK/STAT信号通路起到抗炎作用。在体外抗氧化实验中,通过检测DPPH自由基、ABTS自由基、铁离子螯合能力、ROS含量和HO-1抗氧化酶蛋白表达水平探明其抗氧化生物活性。结果显示,翼柄碎米花提取物具有自由基清除能力,且呈现一定的浓度依赖性;抑制由t-BHP诱导HepG2细胞产生的ROS;增加HO-1抗氧化酶蛋白表达。在体内抗炎实验中,使用LPS滴鼻小鼠建立急性肺损伤模型,并分为5组,即正常组、LPS组、翼柄碎米花提取物低剂量组(5mg/kg)、翼柄碎米花提取物高剂量组(10mg/kg)、地塞米松(DEX)(7.8mg/kg)。其中正常组和LPS组正常灌胃生理盐水7 d,翼柄碎米花提取物低剂量组、翼柄碎米花提取物高剂量组灌胃相应浓度提取液7d,DEX组第6、7d开始腹腔注射。第8d除正常组外,其余组进行LPS滴鼻,24h后牺牲小鼠,收集样品。使用ELISA、流式细胞术和H&E染色方法检测肺泡灌洗液中细胞因子含量、中性粒细胞浸润情况和肺组织病理损伤情况。结果显示,翼柄碎米花提取物可降低肺泡灌洗液中蛋白浓度、中性粒细胞数量和IL-1β的表达量;肺组织病理学结果表明,经翼柄碎米花提取物处理后,肺组织中炎性细胞浸润程度明显减轻,肺损伤评分下降明显且呈一定的浓度依赖性。表明翼柄碎米花提取物可对LPS诱导的急性肺损伤起到保护作用。
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