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目的1、观察乙型肝炎病毒（HBV）对肝癌细胞系HepG2产生天然免疫应答的影响。2、了解细胞质内的DNA识别受体（AIM2、HMGB1、DAI）对肝癌细胞系HepG2中HBV复制的影响及其可能机制。方法1、用HBV1.3复制型质粒pHY106+wta转染肝癌细胞系HepG2，分别在既定时间点提取细胞总RNA，RealtimeRT-PCR检测天然免疫信号分子表达情况。2、用不同浓度AIM2siRNA、HMGB1siRNA、DAIsiRNA与HBV1.3复制型质粒pHY106+wta共同转染肝癌细胞系HepG2，southernblot检测细胞内HBV复制中间体；realtimeRT-PCR检测DAI、HMGB1、AIM2表达情况；ELISA检测细胞上清中HBsAg与HBeAg的表达情况；并分析对HBV复制所诱导的天然免疫产生的IFIT1、IL-6、MxA表达的影响。3、联合阻断两个DNAsensors对HBV复制及蛋白表达的影响。southernblot检测细胞内HBV复制中间体，ELISA检测细胞上清中HBsAg与HBeAg的表达情况。4、MTT法检测siRNA与HBV1.3复制型质粒pHY106+wta共转后对细胞生长的影响。结果1、HBV1.3复制型质粒pHY106+wta转染HepG2后可以启动短暂的天然免疫应答，可以激活DAI、AIM2一过性升高。2、下调DAI、HMGB1的表达后HBV的复制均受到抑制，同时HBsAg和HBeAg的分泌也受到明显抑制。而AIM2表达下调后HBV复制明显增强，同时HBsAg和HBeAg的分泌也增多。3、随着siRNA浓度的升高，AIM2对HBV蛋白分泌的促进作用逐渐降低。而HMGB1、DAI识别蛋白则随着siRNA浓度的升高，对HBsAg和HBeAg抑制效果越明显。4、DAI与TBK1同时下调后，HBV蛋白表达受到抑制，表明DAI的抑制作用起主要作用。DAI与AIM2同时下调后，也表现出对HBV蛋白表达的抑制。HMGB1与TBK1同时下调或HMGB1与AIM2同时下调，都表现出对HBV蛋白表达的抑制作用。5、不论下调AIM2、DAI后，对HBV诱导的IFIT1、IL-6、MxA表达没有影响。但是下调HMGB1后，对HBV诱导的IL-6有影响，对IFIT1没有显著影响，表明HMGB1参与了HBV诱导的NF-kB-IL-6信号途径，没有参与I型IFN信号途径。6、AIM2、DAI对HepG2细胞活力没有明显影响，而HMGB1影响HepG2活力，对细胞生长有影响。结论1、HBV能够诱导HepG2细胞产生天然免疫应答。2、DAI和HMGB1可能通过某未知的信号通路参与了HBV复制和蛋白表达过程的调控，与I型干扰素通路无关。3、AIM2也参与了HBV复制和蛋白表达的调节，其对HBV复制影响机制需要进一步研究.本研究的创新点及意义：对近几年新发现的胞浆内DNA识别分子DAI、HMGB1、AIM2对HBV复制的影响进行了初步研究，首次发现下调AIM2可以促进HBV复制，下调DAI、HMGB1可以抑制HBV复制，这为进一步研究胞质内DNA识别受体对HBV的影响提供了实验基础和依据，并可能为HBV治疗提供新的治疗靶点。