壳寡糖抑制皮肤癣菌活性的研究

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壳寡糖具有广谱抑菌活性,对人畜无毒害,有望成为安全高效的抗真菌药剂。本文采用酶法偶联膜分离技术制备的壳寡糖为材料,研究其对一株红色毛癣菌T. rubrum10-0982的生长抑制作用,并对抑菌机理进行初步分析,主要实验结果如下:1.酶解偶联膜分离的方法制备壳寡糖,主要理化指标为:数均分子量1760.86;脱乙酰度91.08%;灰分0.589%。2.参照M38-A2方案测壳寡糖对T. rubrum10-0982的最低抑菌浓度为2.5mg/mL。MTT比色法测定壳寡糖对T. rubrum10-0982孢子萌发的影响。与对照组相比,在1mg/mL的壳寡糖处理下,对孢子萌发的抑制具有极显著差异(p<0.01)。3.采用生长速率法测定不同浓度壳寡糖对T. rubrum10-0982菌丝生长抑制作用。培养至第11d,10mg/mL的壳寡糖对菌丝生长的抑制率高达51.10%。4.测定了液体培养条件下,壳寡糖对T. rubrum10-0982生物量的影响。当添加1mg/mL的壳寡糖混合培养72h后,与对照组相比,菌丝生物量差异不显著,5mg/mL,10mg/mL的壳寡糖处理组具有显著性差异(p<0.05)。5.测定了液体培养条件下,壳寡糖对T.rubrum10-0982氮素转化的影响。培养72h后,与对照组相比,10mg/mL壳寡糖处理组的菌丝含氮量差异不显著(p>0.05),而20mg/mL,30mg/mL的壳寡糖处理组具有极显著性差异(p<0.01)。6.利用电子扫描显微镜观察皮肤癣菌细胞形态结构。结果表明添加10mg/mL壳寡糖混合培养基培养72h后T. rubrum10-0982的细胞内膜系统被破坏。7.通过构建豚鼠皮肤癣菌病模型,在体内测定壳寡糖对T. rubrum10-0982的抑制作用。对感染皮肤癣菌豚鼠模型进行治疗的第15d,与对照组相比,低剂量壳寡糖处理组没有统计学差异,中剂量的壳寡糖处理组皮损评分有显著性差异(p<0.05),高剂量的壳寡糖处理组皮损评分差异极显著(p<0.01)。
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