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我们利用简并PCR得到的EST片段作为探针筛选Hela细胞cDNA文库,得到一个编码Cdc2相关蛋白激酶的基因hPFTAIRE1。hPFTAIRE1基因编码区全长1410 bp,编码一个469 aa的蛋白,此蛋白的氨基酸序列与小鼠PFTAIRE1蛋白的氨基酸序列同源性为95%。hPFTAIRE1的第140到440个氨基酸存在一个激酶催化结构域,该结构域与Cdc2中的对应结构域有53%的同源性,包括了ATP结合位点以及Ser/Thr蛋白激酶活性位点;hPFTAIRE1 N端140aa及C端约30aa都是此蛋白所特有的,与其它激酶没有任何同源性。序列特征分析发现在hPFTAIRE1蛋白的N端含两个推测的核定位信号,但是亚细胞定位实验表明在Hela细胞中GFP-hPFTAIRE1融合蛋白主要分布在胞浆中。hPFTAIRE1基因在人脑,睾丸,卵巢,心脏,肾脏以及胰腺中大量表达。为了研究受hPFTAIRE1调控的蛋白及其作用底物,我们选用人脑LexA酵母双杂交系统,以全长hPFTAIRE1作为诱饵,筛选与hPFTAIRE1的相互作用蛋白。我们筛选得到7个能与hPFTAIRE1相互作用的蛋白,它们分别是14-3-3β,14-3-3τ,14-3-3η,14-3-3ε,KIAA0202,PLZF和Cyclin Y。14-3-3家族蛋白是一类氨基酸序列高度保守的蛋白,普遍存在于动物、植物和真菌中。其家族成员在脑神经以及中枢神经细胞中也大量表达。我们用免疫共沉淀实验证明hPFTAIRE1蛋白与此家族成员中的四个蛋白之间存在相互作用。序列分析表明hPFTAIRE1氨基酸序列中含有一个14-3-3蛋白识别序列。我们的实验证明该识别序列是hPFTAIRE1与14-3-3蛋白相互作用所必需的,缺失此识别序列的hPFTAIRE1突变体(hPFTAIRE1?)无法与14-3-3蛋白相互作用。