miR-181a/b通过血清反应因子调控平滑肌细胞表型研究

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目的:研究mi R-181a/b通过血清反应因子(SRF,serum response factor)对血管平滑肌细胞向合成型表型转化及细胞增殖迁移能力的调控作用。方法:将mi R-181a/b瞬时转染至人主动脉平滑肌细胞(HAo SMCs)中,用实时定量PCR、CCK-8检测方法和transwell实验分别检测平滑肌细胞的表型标记基因的表达水平、细胞增殖能力和迁移能力的变化。生物信息学分析预测mi R-181a/b直接靶向血清反应因子的3’UTR(非编码区),并通过实时定量PCR、western blot及双荧光素酶报告系统分别验证。结果:实时定量PCR结果表示在HAo SMCs中过表达mi R-181a/b能够抑制收缩表型标记基因的表达,促进合成表型标记基因的表达,CCK-8与transwell实验结果表明mi R-181a/b增强细胞的增殖和迁移能力。双荧光素酶报告系统与western blot结果表明Mi R-181a/b能够直接靶向SRF,抑制SRF的蛋白表达。结论:mi R-181a/b通过直接靶向血清反应因子的3’UTR促进平滑肌细胞由收缩型表型向合成型表型转化。
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