【摘 要】
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目的:探讨长链非编码RNA SNHG1对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症损伤的调控作用及其机制。方法:应用IL-1β诱导原代培养的小鼠软骨细胞构建炎症损伤模型。用不同浓度的IL-1β(0、1、5、10 ng/ml)处理软骨细胞,MTT实验测定细胞活力,qRT-PCR测定炎症因子及SNHG1的相对表达水平。并评估了SNHG1在IL-1β损伤的软骨细胞中过度表达或抑制的生物学功能。然后,
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目的:探讨长链非编码RNA SNHG1对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症损伤的调控作用及其机制。方法:应用IL-1β诱导原代培养的小鼠软骨细胞构建炎症损伤模型。用不同浓度的IL-1β(0、1、5、10 ng/ml)处理软骨细胞,MTT实验测定细胞活力,qRT-PCR测定炎症因子及SNHG1的相对表达水平。并评估了SNHG1在IL-1β损伤的软骨细胞中过度表达或抑制的生物学功能。然后,通过在线数据库(Starbase)筛选SNHG1可能的靶标,并通过qRT-PCR和荧光素酶报告基因实验对SNHG1、miRNA-143-3p及Krüppel样因子2(KLF2)之间的关系进行验证。同时,还通过qRT-PCR、Western blot和流式细胞仪检测下游靶基因异常表达对IL-1β诱导的炎症损伤中SNHG1调节的影响。结果:在IL-1β诱导的软骨细胞中SNHG1表达降低。此外,过表达SNHG1减少了IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,抑制了炎症反应和细胞外基质(ECM)的降解。敲低SNHG1得到相反的结果。从机制上讲,SNHG1发挥海绵作用可直接与miRNA-143-3p结合,而miRNA-143-3p可抑制SNHG1的表达。此外,miRNA-143-3p模拟物的转染逆转了SNHG1过表达对细胞凋亡和ECM降解的抑制作用。此外,KLF2是miRNA-143-3p的靶基因,miRNA-143-3p的加入显着逆转了由SNHG1诱导的KLF2的表达。最后,恢复实验数据表明,SNHG1通过间接调控miRNA-143-3p的下游靶标KLF2发挥其功能。结论:我们的研究表明,lncRNA SNHG1通过靶向miRNA-143-3p/KLF2轴以减轻IL-1β诱导的软骨细胞炎症损伤。提示SNHG1可能是OA的潜在治疗靶标。
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