论文部分内容阅读
脂质体具有与生物体细胞相类似的磷脂双分子层结构，因此有很好的生物相容性，故亦被称为“人工生物膜”、“人工细胞”，脂质体正是运用了这种相容性，实现了药物的靶向或高效递送，近年来在药物制剂和化妆品等领域受到了广泛关注。理想的脂质体应当具备较好的组织相容性、低毒性、合适的药物封装能力及释放能力等特性，而传统的脂质体制备方法都会不可避免的使用到有机溶剂，对于产品本身和环境而言都有不利之处；超临界二氧化碳（SC-CO2）是一种无色，无味，无毒且在最终产品中没有残留物的绿色溶剂，采用超临界二氧化碳快速膨胀法制备脂质体的工艺更加环保。但是普通的磷脂在SC-CO2中的溶解度较小，会导致制备的脂质体产品效果较差或增加助溶剂的使用。本课题采用实验室自制的具有亲二氧化碳性能的改性磷脂作为膜材，提高了其在二氧化碳中的溶解度，以维生素E醋酸酯（VEA）作为模型药物，研究了超临界溶液快速膨胀法（RESS）制备改性磷脂脂质体的工艺过程，讨论了生产条件对制备的脂质体性能的影响规律，得到了性能优良的脂质体产品，并将VEA和丹皮酚共同包裹，制备了VEA-丹皮酚共载脂质体。本文从以下四个方面着重研究：
（1）为了给超临界技术制备改性磷脂脂质体的工艺提供基础数据，采用浊点法测定了VEA在以乙醇（0.5、1.0和2.0 mol%）为助溶剂，温度为313.15 K、318.15 K、323.15 K和328.15 K，压力为8-15 MPa时在SC-CO2中的溶解度。实验结果表明，通过添加乙醇作为助溶剂，可以显著提高VEA在SC-CO2中的溶解度，在恒定乙醇浓度下， VEA的溶解度也会随着压力的增加、温度的降低而增大。在此基础上，采用了六种经典的基于密度的半经验方程来关联实验数据，包括Christil-G，K-J，Bartle，MST-S，Reddy和Pérez模型，这些模型的AARD值范围为2.43%至6.86%，表明这些模型可以很好的预测VEA在SC-CO2中的溶解度数据。
（2）通过浊点法测定了丹皮酚在温度313.15 K、318.15 K、323.15 K、328.15 K、333.15 K、压力为8-15 MPa时在SC-CO2中的溶解度。实验结果表明，在实验范围内压力的升高、温度的降低会使丹皮酚在SC-CO2中的溶解度逐渐增大。此外，采用四种基于密度的半经验模型对实验结果进行关联和预测，结果得出Bartle、MST、Ch and Madras、和Gordillo模型的AARD值分别为9.05%、9.37%、8.75%和8.49%，说明拟合情况较好。
（3）采用具有亲二氧化碳性能的改性磷脂作为膜材，以维生素E醋酸酯（VEA）作为模型药物，研究了RESS过程制备改性磷脂脂质体的工艺。在最优制备条件下，VEA 脂质体的平均粒径约为247.4±6.5 nm，呈球形或椭球形囊泡状结构，包封率高达92.86 ±0.98%，PDI、Zeta电位为0.295±0.012和-42.55±0.64 mV。在功能性实验测试中，制得的改性磷脂脂质体经过 10 天储存后，光热稳定性良好，未出现沉淀现象。此外，改性磷脂脂质体的体外释放特征符合先快速释放而后缓慢释放的特点。
（4）采用RESS过程制备改性磷脂包裹VEA-丹皮酚共载脂质体，我们在25 MPa、55 ℃下采用改性磷脂对VEA和丹皮酚进行共包裹得到了VEA-丹皮酚共载脂质体，制备的共载脂质体呈球形囊泡状结构，其平均粒径约为 271±7.8 nm，PDI、Zeta 电位为0.264±0.022 和-44.7±0.98 mV，此外，对制备的改性磷脂共载脂质体进行了稳定性和DPPH 自由基清除实验研究。在 VEA-丹皮酚共载脂质体功能性试验中发现，相同条件下，VEA-丹皮酚共载脂质体的储存稳定性好于VEA脂质体，且对DPPH自由基的清除能力强于VEA脂质体，说明VEA和丹皮酚具有良好的协同抗氧化作用，使脂质体在低温无氧条件下长期稳定。
（1）为了给超临界技术制备改性磷脂脂质体的工艺提供基础数据，采用浊点法测定了VEA在以乙醇（0.5、1.0和2.0 mol%）为助溶剂，温度为313.15 K、318.15 K、323.15 K和328.15 K，压力为8-15 MPa时在SC-CO2中的溶解度。实验结果表明，通过添加乙醇作为助溶剂，可以显著提高VEA在SC-CO2中的溶解度，在恒定乙醇浓度下， VEA的溶解度也会随着压力的增加、温度的降低而增大。在此基础上，采用了六种经典的基于密度的半经验方程来关联实验数据，包括Christil-G，K-J，Bartle，MST-S，Reddy和Pérez模型，这些模型的AARD值范围为2.43%至6.86%，表明这些模型可以很好的预测VEA在SC-CO2中的溶解度数据。
（2）通过浊点法测定了丹皮酚在温度313.15 K、318.15 K、323.15 K、328.15 K、333.15 K、压力为8-15 MPa时在SC-CO2中的溶解度。实验结果表明，在实验范围内压力的升高、温度的降低会使丹皮酚在SC-CO2中的溶解度逐渐增大。此外，采用四种基于密度的半经验模型对实验结果进行关联和预测，结果得出Bartle、MST、Ch and Madras、和Gordillo模型的AARD值分别为9.05%、9.37%、8.75%和8.49%，说明拟合情况较好。
（3）采用具有亲二氧化碳性能的改性磷脂作为膜材，以维生素E醋酸酯（VEA）作为模型药物，研究了RESS过程制备改性磷脂脂质体的工艺。在最优制备条件下，VEA 脂质体的平均粒径约为247.4±6.5 nm，呈球形或椭球形囊泡状结构，包封率高达92.86 ±0.98%，PDI、Zeta电位为0.295±0.012和-42.55±0.64 mV。在功能性实验测试中，制得的改性磷脂脂质体经过 10 天储存后，光热稳定性良好，未出现沉淀现象。此外，改性磷脂脂质体的体外释放特征符合先快速释放而后缓慢释放的特点。
（4）采用RESS过程制备改性磷脂包裹VEA-丹皮酚共载脂质体，我们在25 MPa、55 ℃下采用改性磷脂对VEA和丹皮酚进行共包裹得到了VEA-丹皮酚共载脂质体，制备的共载脂质体呈球形囊泡状结构，其平均粒径约为 271±7.8 nm，PDI、Zeta 电位为0.264±0.022 和-44.7±0.98 mV，此外，对制备的改性磷脂共载脂质体进行了稳定性和DPPH 自由基清除实验研究。在 VEA-丹皮酚共载脂质体功能性试验中发现，相同条件下，VEA-丹皮酚共载脂质体的储存稳定性好于VEA脂质体，且对DPPH自由基的清除能力强于VEA脂质体，说明VEA和丹皮酚具有良好的协同抗氧化作用，使脂质体在低温无氧条件下长期稳定。