【摘 要】
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目的:观察电针心包经穴MCAO大鼠不同时相点BWT评分、脑梗死体积和脑D-Ser/NR1/Ca2+表达的变化,探讨电针心包经穴对脑缺血后神经毒性的调控作用,为心脑相关学说的科学内涵提供一定的实验依据。方法:实验采取多次随机的方法,第一次随机将360只SD大鼠分为正常组120只、需要造模组240只;造模采用左侧颈总动脉插入线栓的方式制备MCAO大鼠模型,造模成功后,240只模型大鼠第二次随机分为模型
【基金项目】
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国家自然科学基金项目:基于D-Ser对NMDAR门控离子通道的调控探讨电针心包经穴促MCAO大鼠神经修复的机制研究,课题编号:81774421； 湖南省自然科学基金项目:D-丝氨酸在电针心包经穴促MCAO大鼠神经修复中对NMDAR的调节作用及机制研究,课题编号:2018JJ2306； 湖南中医药大学校级科研基金项目:电针手
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目的:观察电针心包经穴MCAO大鼠不同时相点BWT评分、脑梗死体积和脑D-Ser/NR1/Ca2+表达的变化,探讨电针心包经穴对脑缺血后神经毒性的调控作用,为心脑相关学说的科学内涵提供一定的实验依据。方法:实验采取多次随机的方法,第一次随机将360只SD大鼠分为正常组120只、需要造模组240只;造模采用左侧颈总动脉插入线栓的方式制备MCAO大鼠模型,造模成功后,240只模型大鼠第二次随机分为模型组和电针心包经穴组,每组各120只,各组内再随机分为1d、3d、7d、14d、21d五个时相点组,每时相点24只。正常组仅予以捆绑处理,造模组于造模成功24h后予以相应处理,电针心包经穴组予电针治疗,大鼠捆绑后用15mm、36号毫针刺入大鼠瘫痪侧穴位,针刺深度3-4mm,取天泉、曲泽、内关、大陵穴针刺后连接电针仪,模型组予捆绑处理,每次30min,每天1次。采用BWT评分评价处理前后大鼠神经功能缺损情况,各组干预相应天数后分别采用TTC染色法、高效液相色谱技术（HPLC）、Western Blotting法（WB）和流式方法检测各组大鼠脑梗死体积、脑组织D-Ser含量、NR1表达及胞内Ca2+含量。结果:1、BWT评分比较:脑缺血后,模型组、心包经穴组大鼠BWT评分较正常组均降低（p<0.05）,随缺血时间延长模型组14d、21d以及心包经穴组3d、7d、14d、21d大鼠BWT评分逐渐较前升高,（p<0.05）,但与同时相点模型组比,电针心包经穴组处理后3d、7d、14d、21d评分均升高（p<0.05）。2、脑梗死体积:脑缺血后模型组与电针心包经穴组较正常组出现局部缺血灶（p<0.05）,与同时相点模型组比,电针心包经穴组7d、14d、21d脑梗死体积缩小（p<0.05）,其余时间点比无明显差异（p>0.05）。3、D-Ser含量:脑缺血后与正常组比,各时相点模型组、电针心包经穴组大鼠脑组织D-Ser含量均升高（p<0.05）,与同时相点模型组比,电针心包经穴组3d、14d、21d含量降低（p<0.05）。4、NR1表达:脑缺血后与正常组比,电针心包经穴组除3d以外,其余4个时相点及模型组5个时相点脑组织NR1表达均升高（p<0.05）,而电针心包经穴组各组NR1表达均低于同时相点模型组（p<0.05）。5、Ca2+含量:脑缺血后与正常组比,模型组除14d组以外,其余4个时相点及电针心包经穴组5个时相点胞内Ca2+含量均升高（p<0.05）,与同时相点模型组比,电针心包经穴在3d含量降低（p<0.05）,在14d、21d升高（p<0.05）。结论:1.电针心包经穴可改善MCAO大鼠脑梗死体积和神经功能缺损情况,其中神经功能缺损情况随治疗时间的增加改善更明显。2.脑缺血后D-Ser/NR1/Ca2+表达变化呈现一定趋势,电针心包经穴可调节D-Ser/NR1/Ca2+的表达水平,体现在稳定降低D-Ser含量,调控D-Ser/NR1间的相互作用,并随时间差异性调节NR1、Ca2+表达。3.电针心包经穴可能通过调控D-Ser/NR1/Ca2+的表达参与调节兴奋性神经毒性,并促进MCAO大鼠的神经功能恢复。
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