【摘 要】
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该课题采用该实验室保存的一株假丝酵母菌株(Candida sp.Cu-12),对其由Cu诱导产生的蛋白进行分离、纯化和鉴定.经葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析和离子交换(纤维素DE-52)层
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该课题采用该实验室保存的一株假丝酵母菌株(Candida sp.Cu-12),对其由Cu<2+>诱导产生的蛋白进行分离、纯化和鉴定.经葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析和离子交换(纤维素DE-52)层析,分离纯化出Cu<2+>诱导的假丝酵母蛋白纯品及其4个亚型.理化性质及氨基酸组成测定结果显示,分离得到的纯化蛋白及其亚型的平均分子量约为6700Da;蛋白分子由约67个氨基酸组成,其中半胱氨酸数约为14个,占氨基酸总数的20.9﹪;每摩尔蛋白含有约6个Cu原子;等电点为5.44;纯化的蛋白及其亚型均在260nm有紫外特征吸收.分离纯化得到的蛋白及其亚型的理化性质参数符合MT的基本性质,确定是假丝酵母中经Cu<2+>诱导产生的Cu-MT及其4个亚型MT-1,MT-2,MT-3和MT-4.此前未见关于假丝酵母中Cu-MT的相关报道.在清除自由基的功能实验中,纯化出的假丝酵母Cu-MT表现出极强的羟自由基(OH)清除能力和较好的氧自由基(O<,2>)清除能力.其对自由基的清除能力好于酿酒酵母MT和对照药剂抗坏血酸.
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