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抗菌肽（antimicrobial peptides，AMPs）是天然免疫防御系统中的一种重要成分。来源于两栖类动物的阳离子抗菌肽通常是疏水的，与膜作用时一般形成α-螺旋的构象。来自于中国林蛙皮肤分泌物的天然阳离子抗菌肽temporin-1CEa，由17个氨基酸组成，带有3个净正电荷。实验室的前期工作对temporin-1CEa的结构，溶血活性，抗肿瘤作用机制等进行了研究，虽然temporin-1CEa的抗肿瘤活性较好，但对人血红细胞的溶血性性较强，所以我们以temporin-1CEa为模板设计出6种改造肽，以期望降低肽溶血活性的同时能够增强肽的抗肿瘤活性。以temporin-1CEa为模板设计的6种改造肽，分别为LK1，LK2(5)，LK2(6)，LK3，LK2(6)A(L)以及LK2(6)AN(2L)，它们的净电荷数在+4～+7之间，并且都具有较好的两亲性，同时在模拟膜的环境条件下都表现出α-螺旋的二级结构。实验中选用了5种具有不同膜组成成分的乳腺癌细胞作为实验材料。通过MTT的实验结果显示出6种改造肽对5种乳腺癌细胞（MCF-7，SK-BR-3，MDA-MB-231，MDA-MB-453和Bcap-37）均有不同程度的抑制作用，其中MCF-7，SK-BR-3和Bcap-37这3种细胞对肽较为敏感，LK1，LK2(6)，LK2(6)A(L)以及LK2(6)AN(2L)的抗肿瘤活性较强，同时又结合这6种改造肽对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的伤害作用以及溶血实验结果，确定了LK1，LK2(6)和LK2(6)A(L)为后续实验的实验材料。接下来我们分别探讨了这5种乳腺癌细胞的细胞膜成分对肽抗肿瘤活性的影响。流式细胞仪结果显示出5种乳腺癌细胞的细胞膜表面不同程度的表达了PS，HS以及CS。通过特异性酶切方式将肿瘤细胞细胞膜上的HS以及CS降解，以及加入外源性CS等一系列实验发现，temporin-1CEa，LK1，LK2(6)和LK2(6)A(L)的抗肿瘤活性几乎不受CS的影响，相反HS则会抑制肽的抗肿瘤活性。除此之外，通过加入NaClO3来抑制硫酸基团的表达，实验证明了细胞表面带有负电的硫酸基团也会抑制肽的抗肿瘤活性，同时通过甲基-β-环糊精（MβD）降解细胞膜的胆固醇实验，说明了肿瘤细胞细胞膜含有的胆固醇也会影响肽的抗肿瘤活性。