丙戊酸诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化中对Oct-4的影响

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骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一种来源于骨髓的具有多向分化潜能的成体干细胞,它具有的特点包括:多向分化和自我更新的特性,骨髓间充质干细胞在一定的条件和刺激因子作用下,可以分化为神经元样细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞等。但是有关骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的调控机制的研究尚未取得突破性进展。有关研究实验表明,丙戊酸作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂,其能够抑制肿瘤细胞生长和干细胞分化,本研究实验应用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸作为诱导剂,探索大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的过程中对Oct-4的影响。目的探讨丙戊酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成神经样细胞分化过程中对OCT-4的影响。方法体外分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,将其分为两组:对照组,不加丙戊酸,细胞加入预诱导液(含1μmol/Lβ-ME,10%FBS的DMEM/F12)培养24小时,然后换诱导液(含200μmol/L BHA,2%DMSO的DMEM/F12)诱导5小时。实验组,诱导前12小时,在细胞培养液中加入丙戊酸。用倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学法检测NSE、GFAP、Oct-4蛋白的表达。Western blot检测细胞内NSE及GFAP蛋白OCT4的表达。结果倒置显微镜下可以观察到骨髓间质干细胞呈纺锤状、椭圆形,诱导后出现突出,向周围伸出明显突起,呈现神经细胞样形态,并且实验组的细胞突起数量和长度多于对照组;Western blot检测结果实验组的NSE、GFAP蛋白表达高于对照组,Oct-4蛋白的表达实验组高于对照组。结论丙戊酸能够具有诱导骨髓间充质干细胞分化成神经样细胞的能力,并且其增强了Oct-4在BMSCs体外定向诱导分化中的表达。
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