【摘 要】
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纳米载体为不能穿过血脑屏障的中枢神经系统药物进入脑内提供了一种新的方法,在脑部疾病的治疗中起到了重要的作用。其中具有生物活性的磁性纳米载体在实际应用中具有更多优点
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纳米载体为不能穿过血脑屏障的中枢神经系统药物进入脑内提供了一种新的方法,在脑部疾病的治疗中起到了重要的作用。其中具有生物活性的磁性纳米载体在实际应用中具有更多优点和潜力,如药物/基因缓释与磁导向定位的双功能,从而确保药物主要聚集在病灶部位,减少对正常细胞的毒副作用。本课题合成了一种二氧化硅包四氧化三铁磁性复合纳米粒子(Fe3O4@SiO2 NPs),并以人脑毛细血管内皮细胞(hCMEC/D3)建立的单层细胞血脑屏障体外模型为平台,研究细胞穿膜肽(TAT)修饰的Fe3O4@SiO2 NPs在外加磁场的作用下跨过体外血脑屏障模型。具体工作分为以下三个方面: 1,磁性复合纳米粒子的合成: 1)以碱共沉淀法合成四氧化三铁纳米粒子(Fe3O4 NPs); 2)利用经典St(o)ber法,合成核壳结构的Fe3O4@SiO2 NPs,复合纳米粒子的SiO2层厚度及Fe3O4核数量可控; 3)采用硅烷偶联剂氨丙基三甲氧基硅烷(APTMS)进行表面氨基化修饰,通过TEM,XRD,XPS,FTIR,Zeta电位表征纳米粒子的形貌,组成结构及表面性质,VSM表征复合纳米粒子具有良好的磁性能。 2,体外血脑屏障模型的构建: 采用悬挂式细胞培养小室(Transwell)以人脑毛细血管内皮细胞永生系(hCMEC/D3)建立单层细胞血脑屏障模型。并通过多种方法对模型进行评价,结果证实紧密连接蛋白ZO-1充分表达,模型具有完整的屏障功能,对小分子物质及大分子物质都具有极低的通透性。 3,磁性载体跨血脑屏障的研究: 用细胞穿膜肽TAT修饰Fe3O4@SiO2 NPs,MTT实验结果证实修饰后的复合纳米粒子细胞毒性很低。以上述所建血脑屏障模型为平台,考察磁性复合纳米粒子在外加磁场作用下跨血脑屏障的能力。结果证明外加磁场能够提高纳米粒子跨血脑屏障效率,且TAT修饰复合纳米粒子跨血脑屏障效率高于未修饰的纳米粒子。激光共聚焦结果显示TAT修饰复合纳米粒子跨过血脑屏障后进入U251细胞,能够在细胞核部位聚集,具有核靶向功能。
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