自吸自离散式数字核酸扩增微流控芯片的研究

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数字核酸扩增技术是一项对所检测的目标核酸分子进行绝对定量的技术,进行数字核酸扩增检测的前提需要将待检测的目标分子离散为独立的反应单元。设计一种能够自动、简便、高效的执行数字核酸扩增的样品离散化操作的平台,对于数字核酸技术的推广具有重要意义。本文借助软光刻技术的快速成型优势,设计研制了一种可以用于数字核酸扩增的样品自吸自离散化操作的微流控芯片。对芯片的流速、进样的均一性、水分蒸发量和传热性能进行了测试和优化。最后,在所设计的芯片上实现了数字核酸环介导等温扩增(LAMP)检测和数字PCR检测。该芯片整合了PDMS芯片无动力源顺序进样(PFSI)的优势,无需任何外接的驱动设备便可实现样品的自动引入,大大提高了微流控装置的便携性,同时采用“样品自数字化(SD)”的静态液滴阵列生成技术,不需要复杂的阀门结构便可将样品离散为上千个独立的反应单元,进一步降低了微流控芯片制作的复杂度。采用LAMP反应进行数字核酸扩增,可以降低对加热设备温度控制的要求。结合上述优势,本研究所设计的自吸自离散式数字核酸扩增微流控芯片可移动性高,使用方便,非常适用于样品现场检测和稀有样品的快速检测。
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