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恶性肿瘤严重危害人类的生命健康，当传统的治疗方法如手术、化疗、放疗等，对很多中晚期肿瘤患者束手无策时，生物治疗就成为必需的手段。基因治疗即其中之一，它是将基因通过载体转入患者体内，从而达到治疗和预防疾病的目的。肝癌是最常见且死亡率较高的恶性肿瘤之一，我国为肝癌高发国家，每年新发患者在10万以上，在我国农村和城市分别处于恶性肿瘤死亡率的第一、第二位，全世界每年有38.16万人死于肝癌，其中45％在中国。死亡率高，生存期短，严重威胁人民健康。在我国以HBV与肝癌发生的关系最为显著。肝癌临床上手术切除率低，对放、化疗敏感性差，转移情况普遍，预后极差，迫切需要新的治疗方法。近年来随着人们对肝癌分子病理机理研究的不断深入，为正在兴起的肝癌基因治疗提供了理论依据，促进了人们用分子手段治疗肝癌的探索性研究。提出了基因治疗与放疗、化疗、热疗相结合的综合治疗方案的新观点。本研究将C-myc反义核酸（antisense oligodeoxynucleotide，ASODN）和5-FU联合应用对肝癌细胞HEPG-2的生物学影响并观察基因治疗对化疗药物是否有明显的协同增强作用。采用常规培养HEPG-2细胞，用MTT法检测C-myc反义核酸和5-FU对肝癌细胞生长的抑制作用，通过荧光显微镜检测细胞形态变化，DNA电泳技术检测DNA ladder、流式细胞仪检测细胞周期和肿瘤细胞凋亡的发生，RT-PCR及免疫组化方法检测C-myc基因表达变化。结果表明①C-myc反义核酸能够抑制肝癌细胞增殖，诱导肝癌细胞的凋亡，并能够将肿瘤细胞阻滞于G0／G1期。②5-FU能够抑制肝癌细胞增殖，诱导肝癌细胞的凋亡，并能够将肿瘤细胞阻滞于S期。③C-myc反义核酸和5-FU联合应用作用于肝癌细胞时，有明显的协同作用，C-myc反义核酸能够增加肝癌细胞对5-FU的敏感性，提高5-FU对HEPG-2抑制效果。④反义核酸与化疗药物联合应用可大大降低药物浓度，提示化疗药物与基因治疗联合用药确实可起到提高药效降低用药剂量的作用有助于克服单用化疗药物所引起的不良反应大容易发生耐药等缺点并有助于解决单用治疗难以完全抑制肿瘤生长且成本较高等问题。综上所述C-myc反义核酸和5-FU能够分别抑制肝癌细胞的增殖，呈剂量和时间依赖性，当两者联合应用时，表现出协同作用。荧光染色、DNA电泳技术、流式细胞仪检测证实C-myc反义核酸和5-FU都能够诱导肝癌细胞的凋亡。流式细胞仪检测细胞周期发现C-myc反义核酸能够将肿瘤细胞阻滞于G0／G1期，5-FU能够将肿瘤细胞阻滞于S期。RT-PCR及免疫组化方法结果显示C-myc反义核酸和5-FU都能够下调C-myc基因的表达，但这种对C-myc基因表达的抑制并无协同作用，这提示可能有其他基因参与了C-myc反义核酸和5-FU对HEPG-2细胞增殖抑制的协同作用。反义核酸与化疗药物联合应用可大大降低药物浓度，C-myc反义核酸对5-FU有增敏作用。