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副结核是一种慢性传染病,该病是由副结核分支杆菌(MAP)引起的,感染所造成的影响包括:牛奶产量下降,屠宰价值降低,以及由于感染的持续传播造成的牛群使用年限降低等。副结核的控制应该从检疫、标记、淘汰和切断粪口传播等方面综合进行,因此检测方法的准确性和特异性是控制计划的关键。本实验选择了两个有临床型副结核病史的牛场,对两种副结核分支杆菌抗体酶联免疫吸附法(ELISAs)检测试剂盒进行评估。根据评估结果选择IDEXX副结核分支杆菌抗体检测试剂盒,完成北京地区规模化奶牛场副结核流行病学调查。同时,分析不同粪便PCR方法和ELISA方法检测结果之间的相关性。1.采集奶牛血样333份和对应牛的333份粪样,采用两种不同的ELISA抗体检测试剂盒进行检测。对所得到的ELISA结果进行配对比较,Kappa一致系数为0.19。结果表明,本实验证明这两种方法所得检测结果显著不一致,相关性较低,阳性符合率也比较低,因此这两种试剂盒不适用于个体阳性牛的检测,可用于群体水平的检测和流行病学调查。IDEXX副结核分支杆菌抗体检测试剂盒检测效果更稳定,更适合于对牛群做流行病学调查。2.对北京地区两个规模化奶牛养殖场共计326份血清样品进行了副结核分支杆菌抗体流行病学调查。结果显示,副结核抗体阳性率分别为8.5%和32.4%,总体阳性率为22.1%。表明北京地区规模化奶牛养殖场副结核流行情况比较严重且场间存在较大的差异。3.随机采集奶牛血样365份和相应牛的粪样,使用检测副结核ELISA抗体检测试剂盒和分别基于IS900基因序列(PCR1)和f57基因序列(PCR2)的两种PCR检测方法进行检测。分析检测结果,计算三个检测结果之间的相关性和一致性。ELISA和PCR2之间的Kappa系数最高(0.122;一致性较低),其次是PCR1和PCR2(0.03;一致性较低),PCR1和ELISA之间的Kappa系数最低(-0.085)。在三种方法组合中,ELISA对其它两种方法的补充敏感性最高,其次是PCR1。根据实验结果,我们可以通过使用PCR和ELISA来提高检测的特异性。