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视神经的损伤(optic nerve injury)在眼科的临床工作中很常见。视神经损伤后往往预后很差,据统计致盲率可达40%～50%。视神经损伤后的再生很难,因此,探讨视神经损伤后再生困难的机制以及寻找有效方法促进视神经再生是广大学者研究的焦点。传统观点提出,成年哺乳动物的中枢神经损伤后没有再生能力而只有再生反应,Aguage在实验中发现,将坐骨神经移植到视网膜,可明显提高神经节细胞(Retina ganglion cells, RGCs)的存活率,从而促进损伤后的视神经修复再生,这一实验证明视神经损伤后可再生。近年来的大量实验研究发现,损伤视神经的同时损伤晶状体,并成功观察到损伤后的晶状体形成外伤性白内障,可成功提高视网膜神经节细胞的存活机率,从而促进视神经的修复再生。Fischer[2]与Leon两个小组的研究工作表明其可能的机制与神经营养因子(NGF、 BDNF、CNTF等)、局部炎症、晶状体蛋白等有关。近年来,随着髓鞘相关抑制分子Nogo-A[3]、 MAG[4][5]、 OMGP[6]等相继被证实,晶状体损伤对视神经损伤后再生的促进作用的机制是否与这些神经生长抑制因子有关报道很少,本实验拟对此相关机制进行探讨。目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-AmRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制方-法实验动物选取Wistar大鼠,共66只。随即分为三组：A组：正常对照组(6只);B组：单纯视神经损伤组(30只)；C组：视神经损伤联合晶状体损伤组(30只)。分别于7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组化染色检测Nogo-a表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达结果1.视神经的少突胶质细胞中Nogo-a的表达损伤后7天,正常视神经对照组中,Nogo-A染色阳性的少突胶质细胞单行排列,排列规则,阳性细胞数为：117.40±2.84,呈淡蓝色。术后第7天,单纯损伤组神经纤维排列不规则,少突胶质细胞排列紊乱,阳性细胞数为：136.80±3.94,呈深蓝色。视神经联合晶状体损伤组神经纤维排列不规则,少突胶质细胞排列错乱,阳性细胞数：130.40±2.48,呈深蓝色。3组中Nogo-A表达阳性细胞数进行两两比较,除视神经损伤联合晶状体损伤组与单纯损伤组间差异无统计学意义(P=-0.277)外,其余每两组之间的比较都有统计学意义。损伤后14天,阳性细胞计数在正常视神经组为：119.80±4.45,单纯视神经损伤组为：128.40±3.82,视神经损伤联合晶状体损伤组为：122.6±3.23。单纯损伤组与正常喂养组比较差异有统计学意义(P<0.05)、联合损伤组与正常喂养组比较差异无统计学意义(P=0.632),单纯损伤组与联合损伤组之间差异无统计学意义(P=0.121)。损伤后21天,正常组阳性细胞数为：116.60±4.38,单纯视神经损伤组阳性细胞数为：130.40±2.48,视神经损伤联合晶状体损伤组为：104.40±6.78。三组之间每两组之间的比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2.样本经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳后显示Nogo-A mRNA在单纯损伤组和联合损伤组均可检测到,且在术后7d、14d和21d, LabWorks软件分析显示Nogo-A mRNA的扩增表现出很稳定的表达水平。结论1.正常视神经也可见Nogo-a和Nogo-A mRNA的表达,且三个时间点表达较稳定。2.单纯视神经损伤组及联合损伤组后Nogo-A表的阳性细胞数明显增多。3.晶体状损伤促进轴突再生的机制与Nogo-A有关,可能是晶状体损伤后阻碍了Nogo-A mRNA的转录过程或者影响了Nogo-A的稳定性。