石斛多糖提取、抗氧化活性比较及结构的初步探究

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石斛(Dendrobium)是兰科石斛属多年生名贵中药材,多糖是石斛中含量最多的活性成分。寻求更高活性的石斛多糖和探索结构与活性的关系一直是研究的重点。已有研究表明,多糖的降解和分离纯化均能提高生物活性,多糖的降解在海藻类多糖的研究报道较多,但尚未见以降解石斛多糖为实验材料的结构和活性研究。本研究以铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)、金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)和叠鞘石斛(Dendrobium denneanum Rchb.f.var.denneanum(Kerr)Z.H.Tsi)为材料,从石斛多糖的降解、分离纯化、理化特性、抗氧化活性评价及初级结构鉴定等方面进行系统的研究,以期为石斛多糖的开发与利用提供理论基础。主要结果如下:1.采用水提醇沉法得铁皮石斛粗多糖(DOP)、金钗石斛粗多糖(DNP)和叠鞘石斛粗多糖(DDP)。采用H2O2+VC体系降解石斛粗多糖,获得降解多糖(DDOP,DDNP,DDDP)。同时将DEAE-52纤维素层析柱和葡聚糖凝胶G-100层析柱相结合分离纯化粗多糖,每个品种分别获得两个分离纯化多糖(DOP-1,DOP-2;DNP-1,DNP-2;DDP-1,DDP-2)。2.石斛多糖样品进行抗氧化活性比较,均表现一定的浓度依赖性,且不同抗氧化活性指标间起活性的组分或官能团不同。其中DDOP具有最好的Fe2+螯合力和ABTS+·的清除力,DDDP具有最好的·OH清除力,DDNP有较好的还原力。3.采用离子色谱法测得DDOP主要由甘露糖,鼠李糖,葡萄糖,木糖和果糖组成,DDNP主要由甘露糖,葡萄糖,木糖和果糖组成,DDDP主要由甘露糖,葡萄糖,果糖和木糖组成。其摩尔比分别为0.70:0.15:6.72:0.38:0.44,0.71:7.62:0.22:0.44,0.65:4.88:0.26:0.18。4.采用HPLC-GPC法测得三个高抗氧化活性多糖样品的分子量为DDNP=16.4kDa>DDDP=11.9 kDa>DDOP=11.8 kDa。5.采用红外光谱和核磁共振对三个多糖样品进行结构解析,结果显示均含有糖类化合物的特征吸收峰,具有乙酰基、MeO和糖醛酸基团,并在C2、C3、C4、C5、C6均可能存在不同的取代。DDOP是β-构型呋喃糖环多糖片段,DDNP是β-构型吡喃糖环多糖片段,DDDP是具有三股螺旋结构的α-构型吡喃糖环多糖片段。
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