研究背景随着围产医学及新生儿重症监护技术的发展，早产儿存活率较前明显增加，随之而来的是早产儿脑损伤的发病率的升高。这一问题已愈来愈受到关注，早产儿脑损伤的发病机制已成为医学界研究的热点。早产儿脑室周围白质软化（periventricularleukomalacia，PVL）是早产儿最常见的脑损伤类型，可引起痉挛性脑性瘫痪、认知及行为学异常等后遗症。促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）作为造血因子除了用于早产儿贫血的治疗外，在早产儿脑损伤中也具有神经保护作用。故本实验通过对3日龄SD大鼠单侧颈总动脉结扎+缺氧建立PVL模型的基础上给予EPO进行干预，从病理形态学、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫组织化学及远期神经行为学试验检测大鼠的神经运动功能、情感能力和Y-迷宫刺激试验检测学习和记忆情况从而探索EPO对PVL新生鼠的神经保护作用。目的通过对3日龄新生鼠脑室周围白质软化模型的建立探讨EPO对早产脑白质损伤鼠的神经保护作用，为临床早期干预早产儿脑白质损伤提供一定的理论依据。方法150只3日龄（P3）SD大鼠随机分为对照组和实验组，实验组又分为实验1组（EPO治疗组）和实验2组（PVL组）。对照组仅分离左侧颈总动脉，不结扎不缺氧。实验组大鼠结扎左侧颈总动脉，于术后在6%氧气+94%氮气混合气中缺氧2.5小时。实验1组（EPO治疗组）在实验组基础上腹腔注射EPO5000U/kg而实验2组（PVL组）在实验组基础上腹腔注射等量的生理盐水。分别于术后3d、7d、14d、21d测量体质量后断头取脑测量脑重量、脑质量损伤百分比，石蜡包埋切片行常规HE染色、GFAP免疫组化，剩下的大鼠于生后30d进行神经行为学试验（悬吊试验、旷场试验）和Y-迷宫刺激试验分别检测大鼠远期的神经运动功能、情感能力和学习记忆情况。结果1.行为学：对照组大鼠术后无明显行为改变，PVL组和EPO组大鼠缺血缺氧后均出现异常行为学改变，EPO组大鼠主要表现为嗜睡，较易激惹，部分鼠偏向一侧爬行或不能翻身，吃奶及活动稍减少，动作不协调，PVL组不仅表现为嗜睡，易激惹，大多数鼠偏向一侧爬行或不能翻身，吃奶及活动明显减少，有的可见全身发绀，躁动不安，四肢抽动，甚至死亡。2.体质量增长：术后3d、7d及14d PVL组术后体质量增长明显落后于EPO组和对照组，差异有统计学意义[术后3d：（9.8±0.62）比（11.7±0.80）、（13.8±0.41），术后7d：（12.1±0.46）比（16.1±0.62）、（18.2±0.53），术后14d：（23.5±0.89）比（28.4±0.62）、（33.8±0.71），P均<0.05]；3.脑质量/体质量：术后1d PVL组及EPO组大鼠脑质量/体质量均大于对照组，差异具有统计学意义[（5.37±0.38）、（3.83±0.22）比（2.92±0.32），P<0.01]，术后21dPVL组及EPO组大鼠脑质量/体质量均小于对照组，差异具有统计学意义[（2.61±0.11）、（2.81±0.07）比（3.70±0.05），P<0.01]；4.脑质量损伤%：PVL组和EPO组各时间点的脑质量损伤%随着日龄的增加而增大，且术后1d、7d及21d脑质量损伤%均大于对照组，差异具有统计学意义[术后1d（：27.74±7.25）、（13.36±5.40）比（0.29±0.47），术后7d：（37.65±8.12）、（25.32±6.51）比（0.37±0.17），术后21d：（40.95±11.34）、（34.38±10.37）比（0.18±0.08），P均<0.05]；5.HE染色：HE染色示术后7d对照组结构正常，皮质下白质及胼胝体神经纤维束形态及走向清晰，PVL组可见皮质下及胼胝体结构松散，胼胝体神经纤维束紊乱、呈现疏松网状，EPO治疗组皮质下结构基本正常，胼胝体神经纤维束走向较清晰，胼胝体神经纤维束结构基本正常；术后21d对照组侧脑室正常，EPO组侧脑室三角区稍微扩大，PVL组侧脑室三角区扩大明显；6.免疫组织化学：免疫组织化学结果显示术后3d与对照组、EPO组相比PVL组GFAP阳性细胞数目出现增多（P<0.05），术后7d与对照组相比EPO组和PVL组GFAP阳性细胞均明显增多（P<0.05），且PVL组增多更为明显（P<0.05）；术后14d EPO组与PVL组GFAP阳性细胞数开始回落，但仍多于对照组（P<0.05），PVL组阳性细胞数仍然比EPO组多（P<0.05），术后21d各组GFAP阳性细胞数基本回落至正常水平；7.神经行为学试验:神经行为学试验悬吊试验中PVL组鼠大部分反应迟钝，很少有肢体活动，极易从玻璃棒上掉下，PVL组及EPO组大鼠悬吊试验的分数均低于对照组大鼠，差异有统计学意义[（1.00±0.76）、（2.38±0.91）比（3.87±0.83），P<0.05]，旷场试验中PVL组鼠大部分行为及其迟缓，穿越方格数很少，分数均低于对照组及EPO组且具有统计学意义[（5.00±1.20）比（7.37±0.92）、（10.12±1.24），P<0.05]；8.Y迷宫试验:Y迷宫试验中PVL组及EPO组所需训练次数较对照组多且有统计学差异[（31.25±2.60）、（25.1±1.89）比（19.63±3.38），P<0.05]，24小时后记忆保持率PVL组相比EPO组、对照组低且差异具有统计学意义[（43.0±5.65）比（56.4±9.18）、（75.4±5.51），P<0.05]，以PVL组24小时后记忆保持率最低。结论1.通过对3日龄SD大鼠行单侧颈总动脉结扎+缺氧2.5h可成功构建PVL模型；2.脑白质软化时GFAP阳性细胞表达增加，且损伤后3d开始出现，7d达高峰期，损伤后21天基本回落至低表达水平；3.EPO能减少脑白质软化后GFAP阳性细胞的表达，在神经细胞损伤的修复中起到一定的作用；4. EPO能在一定程度上改善脑白质软化后大鼠的随意运动功能障碍及情感能力异常，提升学习和记忆能力。