饲料中添加血根碱对草鱼生长、免疫及肠道健康的影响

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本试验旨在揭示饲料中添加血根碱对草鱼(91.04±0.37g)生长性能、免疫及肠道健康的影响,参考草鱼商业饲料配方,设置鱼粉饲料(鱼粉5%,粗蛋白30%)为对照组,设置两种价格一致的低成本基础饲料:高棉粕菜粕基础饲料(鱼粉2%,粗蛋白30%)和低蛋白基础饲料(鱼粉4%,粗蛋白28%),在两种基础饲料中分别添加0、200、400、800mg/Kg的纯度为0.15%血根碱,共配置9组饲料。养殖实验于车田江水库网箱(2m×2m×2m)中进行,选取健康、规格一致的草鱼随机分为9个处理,每个处理3个重复,每个重复25尾鱼,持续8周。实验结果如下:1、血根碱对草鱼生长、消化酶活力及肌肉质构的影响与对照组相比,0mg/Kg高棉粕菜粕组草鱼生长无显著差异,但有降低存活率(SR)的趋势,随血根碱添加水平的提高,SR和增重率(WRG)呈增高的趋势,在800mg/Kg组达到最大值(P>0.05);相比0mg/Kg组,800mg/Kg组总胆固醇(T-CHO)、血氨显著降低(P<0.05),Na~+K~+-ATP酶、肌酸激酶(CK)活性显著升高(P<0.05);0mg/Kg组相比对照组肌肉硬度、胶黏性和咀嚼性显著提高(P<0.05),添加400、800mg/Kg血根碱呈降低趋势,与对照组差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,0mg/Kg低蛋白组草鱼生长无显著差异,但WGR和SR均呈降低趋势,随血根碱添加水平的提高,SR呈升高的趋势(P>0.05)。相比0mg/Kg组,800mg/Kg组血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、CK显著升高(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05),Na~+K~+-ATP酶显著高于对照组(P<0.05)。实验结果表明:高棉粕菜粕和低蛋白饲料中添加血根碱均有提高生长性能的趋势,提高消化能力,其中在高棉粕菜粕饲料中的添加量为800mg/Kg时效果最佳。2、血根碱对草鱼免疫及相关基因表达的影响与对照组相比,0mg/Kg高棉粕菜粕组草鱼显著降低肠道超氧化物歧化酶(SOD)活性,提高丙二醛(MDA)含量(P<0.05);添加800mg/Kg血根碱时显著提高补体C3含量、SOD活性,降低MDA含量(P<0.05)。进一步研究发现,与对照组相比,0mg/Kg高棉粕菜粕组显著下调肠道MnSOD、IL-1、TLR-4、TLR-8、Clandin、occludin、ZO-2的基因表达水平(P<0.05);添加800mg/Kg血根碱时显著上调MnSOD、IL-1、occludin的基因表达水平(P<0.05),并与对照组差异不显著(P>0.05),下调Keep1、Nrf-2、IL-6、TNF-α基因表达水平(P<0.05)。与对照组相比,0mg/Kg低蛋白组SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),添加800mg/Kg血根碱时SOD显著升高(P<0.05),并与对照组差异不显著(P>0.05)。3、血根碱对草鱼肠道结构形态及肠道微生物多样性的影响高棉粕菜粕饲料和低蛋白饲料中添加血根碱分别提高草鱼前、中肠绒毛高度/隐窝深度值(V/C值),改善肠道粘膜结构,修复高棉粕菜粕及低蛋白对肠道造成的部分损伤。取肠道内容物基于16sRNA分析肠道微生物群落结构组成,与对照组相比,0mg/Kg高棉粕菜粕组明显降低了shannon指数、OTUs数,添加800mg/Kg血根碱后OUTs数显著降低。在属水平,醋酸杆菌属(Cetobacterium)、拟杆菌属(Bacteroides)和气单胞菌属(Aeromonas)组成了核心微生物菌属,0mg/Kg高棉粕菜粕组显著提高Cetobacterium和Aeromonas丰度,降低Bacteroides丰度,添加800mg/Kg血根碱后显著降低Aeromonas丰度,提高Bacteroides丰度,趋向对照组改变肠道微生物群落结构。结论:血根碱有提高草鱼生长性能的趋势,在高棉菜粕中的添加效果优于低蛋白饲料,能提高消化吸收能力,增强免疫抗氧化能力,改善肠道结构功能及肠道微生物群落结构。
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