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蛹虫草(Cordyceps militaris)是一种久负盛名的药用真菌,营养成分极为丰富,具有卓越的医疗和滋补功效。目前,关于蛹虫草的研究主要集中在虫草素和虫草多糖两种活性成分上,对其他有效成分的研究较少。本文从筛选性状优良的蛹虫草菌株出发,通过优化人工栽培实验和液体发酵条件,首次对人工栽培子实体和发酵菌丝体中类胡萝卜素和黄酮类化合物的提取分析进行了研究。(1)通过组织分离法对采集的野生蛹虫草菌株进行分离纯化,以人工栽培实验选择优良菌株。菌株SY12子实体的质量最好,子实体平均长度9.10cm,平均直径2.5mm,平均鲜重31.71g,平均生长周期45d,通过连续栽培实验验证,菌株SY12具有良好的遗传稳定性。(2)以干菌丝体得率为指标,通过单因素和正交实验对蛹虫草液体发酵条件进行优化研究,确定最佳发酵条件为:蔗糖4%、蛋白胨1.5%、硫酸铵0.6%、KH2PO4 0.05%、MgSO40.02%、VB1微量,温度25℃、初始pH 7.0、装液量100/250mL三角瓶、接种量8.0%、发酵时间96h。在最佳发酵条件下,SY12最大生物量可达18.7g/L。(3)酸热法是蛹虫草中类胡萝卜素提取的有效方法,通过正交实验得到其提取的最佳工艺条件:盐酸浓度1mol/L、盐酸用量15mL/g、酸浸时间20min、热处理时间4min。在此浸提条件下,蛹虫草中类胡萝卜素含量可达2158μg/g。蛹虫草中类胡卜素的紫外—可见光光谱吸收峰值分别在415nm、439nm和468nm处,与类胡萝卜素的紫外特征吸收值相符。(4)通过单因素实验和正交实验,确定乙醇回流法提取黄酮的最佳条件:乙醇浓度75%、液料比40∶1、提取时间60min、提取次数2次。经TLC法结合硅胶柱层析对提取物进行分离,通过颜色反应和紫外特征吸收进行鉴定。蛹虫草中类胡萝卜素和黄酮化合物的提取分析研究,为蛹虫草的内在有效成分的全面分析及其药用价值的研究提供了重要的参考依据。