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背景及目的:前列腺癌是男性泌尿生殖系统中最为重要的肿瘤之一。在我国,随着国民经济的不断发展、老龄人口逐年增加,前列腺癌的发病率呈显著增长趋势,有研究显示国内部分地区的前列腺癌发病率达到7.7/10万,位列全身肿瘤的第7位。前列腺癌的治疗方法主要包括外科治疗、放疗和激素治疗,其中外科治疗是目前认为可以治愈前列腺癌的方法,根治性手术要考虑肿瘤的临床分期、预期寿命和健康状况。放射治疗对于局限性前列腺癌的疗效与根治性手术相似。内分泌治疗可以有效的延缓前列腺癌的进展,但是经过中位时间14-30个月后,几乎所有患者病变都将逐渐发展为激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC),在激素非依赖的早期,有些患者对二线治疗仍有反应,但最终都将发展为激素难治性前列腺癌(hormone-refractory prostate cancer,HRPC)。对于AIPC、HRPC、丧失根治性手术机会和转移的患者目前尚无有效的治疗手段,因此如何改善这类前列腺癌患者的预后、延长患者的生存期一直是国内外学者努力探求的目标。树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内功能最强的抗原提呈细胞,DC是专职抗原呈递细胞(antigen presenting cell;APC),其递呈抗原,激发T细胞增殖的能力是其它抗原递呈细胞的100-1000倍,DC不仅可以极其高效的提取、处理、加工和提呈抗原,而且能直接激活初始型T细胞。研究证明,DC可以启动抗原特异性T细胞识别和杀伤肿瘤细胞。正是因为DC在免疫应答中的举足轻重的地位,使其成为免疫学领域的研究热点,尤其是DC瘤苗的研究和应用倍受关注。本实验的目的就是研究通过将前列腺癌的RNA负载DC制备DC瘤苗,并通过多种分子生物学技术及免疫学技术研究DC瘤苗的分子生物学特性和抗肿瘤细胞功能。通过该实验研究,可能为以DC为基础的前列腺癌免疫治疗提供一条新的治疗策略,从而进一步应用于临床。材料与方法:首先通过密度分离法分离获得健康志愿者外周血的单核细胞(peripheral blood monouclear cells,PBMC),用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介-4(rhIL-4)与PBMC共同培养产生DC细胞。提取前列腺癌PC-3细胞总RNA致敏DC细胞并用流式细胞仪检测致敏后细胞及PBMC的表面标志物CD14、CD40、CD80、CD86的表达。致敏后的DC与淋巴细胞共同培养诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),以诱导产生的T淋巴细胞为效应细胞,以PC-3前列腺癌细胞为靶细胞,共同培养后用MTT细胞毒检测试剂盒检测特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤率。最后用统计学软件SPSS对结果进行分析。P值取0.05。结果总RNA致敏后诱导后的DC细胞高表达CD40(63.28±3.74)、CD80(67.79±3.55)和CD86(77.24±3.06),较前CD40(16.13±1.00)、CD80(13.60±1.28)、CD86(15.76±1.43)相比显著增高,低表达CD14(17.45±1.53),较前(42.04±2.89)显著降低(P＜0.05),有统计学意义。前列腺癌组杀伤率(55.27±9.76)与空白对照组杀伤率(36.75±7.06)之间的差异有统计学意义(p=0.009＜0.05)。胃癌对照组杀伤率(36.75±7.06)与空白对照组杀伤率(35.66±7.85)之间差异无统计学意义(p=0.834＞0.05)。前列腺癌组和胃癌组杀伤率(p=0.008＜0.05)之间差异无统计学意义。结论经总RNA致敏的DC培养2天后表达CD40、CD80、CD86较前显著增高,CD14表达较前显著降低,表明已经成功产生成熟的DC细胞。经过肿瘤细胞总RNA致敏后的DC诱导产生的CTL与肿瘤细胞共同培养可以对肿瘤细胞产生杀伤作用。并且这种杀伤作用是有特异性的