目的:建立一种微量样品羟自由基（·OH）的检测方法和用试纸条检测羟自由基（·OH）的方法,并用该方法检测具有抗氧化物质的抗氧化活性能力。方法:⑴采用Mn²⁺-H₂O₂-EBT法,系统中,设定测定为560nm,在2mL的比色皿中,取缓冲溶液（NaB₄O₇-NaOH）300μL、EBT120μL、Mn²⁺300μL、H₂O₂150μL,将体系体积用水补充至2.0mL。Mn²⁺-H₂O₂-EBT法可作为检测抗氧化物质抗氧化活性的有效可行方法之一,为验证该方法对微量样品抗羟自由基（·OH）活性实时检测的可行性,以抗坏血酸对照。⑵利用Fenton反应的原理,用紫外-可见分光光度法优化了羟基萘酚蓝（HNB）、钙羧酸指示剂（NANA）、4-（2-吡啶偶氮）-简苯二酚（PAR）、茜素红、二苯代苦味肼基自由基（DPPH·）、镉黑T（EBT）、5-Br-PSAA等吡啶偶氮类化合物的最大波长、显色剂的浓度、pH、金属离子和[H₂O₂]等条件,并测定产生的羟自由基产生量。按照显色剂的优化条件的试管实验移动到试纸条上,进一步优化试纸反应的条件,试纸插入2min后取出,自然干燥以后加H₂O₂,观察试纸的颜色变化。为验证该方法可行性,以维生素C、硫尿、甘露醇为对照。结果:⑴建立的Mn²⁺-H₂O₂-EBT法稳定性好、操作简便、快速,可作为一种简便筛选抗氧化剂的方法,实验结果表明,新疆葡萄树伤流液、金银花茶、罗布麻茶、茉莉茶和竹叶茶等均具有较强的清除羟自由基（·OH）的生物活性功能,是一种很好的天然抗氧化及自由基清除剂。⑵用紫外-可见分光光度法来考察和优化六种显色剂,并优化出来的条件移动试纸条上,最终得到的试管反应和试纸反应结果一致,用试纸法可以检测具有抗氧化物质的羟自由基能力。结论:⑴微量样品抗羟自由基检测方法可行,实现吸光度测定的同时,对少量样品进行实时、恒温及震荡在线检测,连续观察吸光度的变化。本试验中所建立的检测方法中Mn²⁺-H₂O₂体系能产生较强的羟自由基（·OH）,可用于抗氧化物质的清除率羟自由基（·OH）活性的测定。⑵所建立的试纸检测方法简单、方便、快速,可用于现场抗氧化物质清除率羟自由基（·OH）活性的快速检测方法。