论文部分内容阅读
腺样囊性癌(ACC，Adenoid cystic carcinoma)具有嗜神经侵袭的生物学特性，这一特性与肿瘤复发和预后密切相关。目前关于腺样囊性癌嗜神经侵袭的研究较多，但其侵袭机理及途径均不清楚。大多数学者倾向于微环境理论学说，但对于在肿瘤-神经这种特殊微环境中究竟有无细胞因子起主导作用，尚未见相关报道。本课题旨在分离提纯可能刺激神经生长的肿瘤细胞分泌蛋白，为腺样囊性癌嗜神经侵袭的机理研究打下良好基础。首先在对我院腺样囊性癌嗜神经侵袭的临床病理资料进行归纳分析的基础上，对腺样囊性癌侵犯神经标本进行光镜及电镜观察。不仅对腺样囊性癌嗜神经侵袭的侵袭途径及相应病理学变化有了初步了解，同时发现在实体肿瘤病理组织切片中散在多个不知名小神经断面。因而推测，ACC肿瘤本身可分泌某种神经营养物质，诱导了周围神经发出突起向肿瘤组织内生长，继而激发了一系列后续神经侵袭现象。尔后成功构建涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83与鸡胚背根神经节(DRG，Dorsal root ganglion)组织共培养模型，观察到肿瘤细胞能形成促使神经生长的微环境，对背根神经节突起具有诱向生长作用。随后利用SACC-83的24小时条件培养基对背根神经节进行培养，并与SACC-83细胞裂解液、单纯基础培养基、含血清培养基及其它细胞条件培养基相比较，发现SACC-83条件培养基具有明显的促神经突起生长的作用，从而排除了在前述共培养模型中细胞碎屑、血清、基础培养液等因素的干扰，进一步明确了是SACC-83细胞分泌的某些特异性生长因子在发挥作用。为进一步探索发挥作用的肿瘤细胞分泌物质，我们通过盐析浓缩、凝胶层析、离子交换层析等蛋白质分离技术，结合神经细胞培养测活，逐步缩小范围，对肿瘤细胞分泌蛋白中可能发挥作用的因子进行了初步分离筛选。迄今已发现SACC-83细胞总分泌蛋白具有促神经细胞生长的作用，进一步分离发现起主导作用的蛋白分子量多大于43kD，属中性蛋白或碱性蛋白。进一步的确定纯化尚在进行中。