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目的:用肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为瘤苗,研究其对小鼠机体免疫活性的影响及对再植入肿瘤的免疫排斥作用。 方法:小鼠分5组,采用经60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞、未经60Co照射的含人肿瘤坏死因子基因的人肝癌细胞、经60Co照射的人肝癌细胞、未经60Co照射的人肝癌细胞和生理盐水分别接种小鼠,用MTT法检测各组小鼠脾脏NK细胞活性及淋巴细胞转化率。用SABC免疫组化法检测T淋巴细胞亚群。用小鼠肝癌细胞株H22移植于各组小鼠,观察肿瘤生长情况,应用TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡指数。 结果:经80gy60Co照射的转基因细胞增殖能力消失,但仍能持续分泌TNF-α两周以上,细胞在三周内全部死亡。转基因瘤苗接种小鼠后,无明显副作用。转基因组、转基因60Co照射组、未转基因组、未转基因60Co照射组、生理盐水组小鼠脾脏NK细胞活性各为:66.26±6.77%、64.58±7.82%、53.20±7.02%、51.44±7.83%、27.06±5.25%;T淋巴细胞亚群CD4+值各为:45.46±1.46%、43.00±1.39%、38.66±1.80%、33.90±4.81%、34.12±3.56%;T淋巴细胞亚群CD8+值各为:31.68±1.53%、29.52±2.17%、25.66±2.75%、23.88±1.44%、24.30±4.08%;经各组比较分析,转基因瘤苗接种组的NK细胞活性及CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群增高有显著意义(P<0.05 or P<0.01)。而淋巴细胞转化率无明显变化;转基因组、转基因60Co照射组、未转基因组、未转基因60Co照射组、生理盐水组移植肿瘤成活率各为:50%、50%、62.5%、75%、100%差异有显著性(P<0.05);移植肿瘤重量各为:2070.9±377.5mg、2191.7±326.2mg、3685.4±398.8mg3804.5±451.9mg、4154.1±219.4mg差异有显著性(P<0.05);移植肿瘤体积大小各为:1210.8±126.5mm3、1133.0±136.4mm3、 1424.4t164.4 mm‘、1472.7土186D mm’、1569.9上127.lmm’差异有 显著性叹叨05皿k0.01) 移植肿瘤细胞凋亡指数各为: 3.73幼石玉%、3.9肚O.71%、2.02土玉*9%、且厂2功名9%、0.65功.X% 差异有显著性o硼刀5 Of P刃刀Q…总的来说,转基因瘤苗接种组移 植肿瘤成活率下降,生长受抑制,细胞凋亡指数增高。 结论:肿瘤坏死因子基因转导的瘤苗无明显副作用,使用是安 全的。这种瘤苗具有提高小鼠机体免疫力的作用,对再植入肿瘤 细胞有较强的免疫排斥作用。本研究提示这一瘤苗对肝癌的治疗 有较大意义。